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摘要:本发明公开了一种用于分化含有心脏和肝脏细胞的类器官试剂盒。本发明公开的试剂盒含有培养基1、培养基2和培养基3;各培养基的溶剂均为RPMI1640培养基,培养基1的溶质为5μmolCHIR99021、2%B27、550μgmLL‑抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐和0.5μmolBMP4,培养基2的溶质为2.5μmolKY02111、2%B27、550μgmLL‑抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐和5μmolActivinA,培养基3的溶质为2%B27、550μgmLL‑抗坏血酸‑2‑磷酸三钠盐和1%KOSR。利用本发明的试剂盒可将多能干细胞在体外诱导分化为含心脏和肝脏细胞的类器官。
主权项:1.制备含有心脏细胞和肝脏细胞的类器官的方法,包括:1将多能干细胞在培养基0中培养,得到多能干细胞球;所述培养基0为含有Y27632的人多潜能干细胞培养基;2将所述多能干细胞球置于基质胶中至基质胶凝固,得到基质胶包裹的多能干细胞球;将所述基质胶包裹的多能干细胞球置于培养基1中培养,得到培养基1培养后的多能干细胞球;所述培养基1由溶剂和溶质组成,所述溶剂为RPMI1640培养基,所述溶质及其浓度分别为5μmolCHIR99021、2%体积百分比B27、550μgmLL-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐和0.5μmolBMP4;3将所述培养基1培养后的多能干细胞球置于基质胶中至基质胶凝固,得到基质胶包裹的培养基1培养的多能干细胞球;将所述基质胶包裹的培养基1培养的多能干细胞球置于培养基2中培养,得到培养基2培养后的多能干细胞球;所述培养基2由溶剂和溶质组成,所述溶剂为RPMI1640培养基,所述溶质及其浓度分别为2.5μmolKY02111、2%体积百分比B27、550μgmLL-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐和5μmolActivinA;4将所述培养基2培养后的多能干细胞球置于培养基3中培养,得到含有心脏细胞和肝脏细胞的类器官;所述培养基3由溶剂和溶质组成,所述溶剂为RPMI1640培养基,所述溶质及其浓度分别为2%体积百分比B27、550μgmLL-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐和1%体积百分比KOSR。
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百度查询: 深圳市人民医院 一种用于分化含有心脏和肝脏细胞的类器官试剂盒
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