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摘要:本发明公开了一种测定人血浆依拉环素浓度的方法,包括提供待测血浆样品,配制不同浓度的血浆标曲样品;预处理血浆样品;制定标准曲线;测试并计算待测血浆样品中的依拉环素浓度。本发明以氘代依拉环素为内标。依拉环素血浆样品用含三氟乙酸的甲醇水溶液对其中的蛋白进行沉淀。预处理后的样品使用高效液相色谱分离上清液中的药物成分,然后使用高分辨质谱多反应监测模式进行药物靶向性检测,并进行定量,实现对血浆中依拉环素浓度的分析测定。本发明方法在具有快捷性的同时,兼具极高的靶向性,表现出快速、高通量、高灵敏度、特异性强、精密度和准确度良好、稳定性好、提取回收率高等优点。本发明方法可用于临床上依拉环素的血药浓度监测。
主权项:1.一种测定人血浆依拉环素浓度的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤S0,提供待测血浆样品;步骤S1,配制不同浓度的血浆标曲样品:分别取空白血浆与依拉环素的甲醇水溶液配制得到一系列梯度浓度的血浆标曲样品,其中,所述血浆标曲样品中含1ngmL~500ngmL依拉环素;步骤S2,预处理血浆样品:向所述待测血浆样品及所述血浆标曲样品中分别加入内标工作液,混合均匀后,加入沉淀剂沉淀所述待测血浆样品及所述血浆标曲样品中的蛋白,分离,取上层清液;所述内标工作液为氘代依拉环素的甲醇水溶液;步骤S3,制定标准曲线:将经所述预处理的血浆标曲样品在高效液相色谱联用质谱仪上进样测试,得到依拉环素峰面积和内标峰面积的比值;以依拉环素的浓度为横坐标,以所述比值为纵坐标,求得标准曲线;步骤S4,测试并计算所述待测血浆样品中的依拉环素浓度:将经所述预处理的待测血浆样品在高效液相色谱联用质谱仪上进样测试,得到依拉环素峰面积和内标峰面积的比值,将所述比值代入所述步骤S3得到的标准曲线,求得所述待测血浆样品中的依拉环素浓度。
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