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摘要:本发明属于植物抗病毒基因工程领域,公开了一种抗病毒马铃薯植株的制备方法及其应用。制备方法包括:1以pHSE401为骨架,构建载体,以在StPCaP1基因的第762位至第781位核苷酸引入插入、缺失或替换突变;2将获得的载体转化农杆菌,将筛选出的农杆菌阳性转化子利用农杆菌介导的叶盘转化法转化马铃薯,筛选StPCaP1基因敲除的马铃薯植株;3摩擦接种马铃薯病毒至StPCaP1基因敲除的马铃薯植株,检测其抗病毒能力,得到抗病毒马铃薯植株。采用本发明的制备方法制备得到的抗病毒马铃薯植株,能够明显抑制马铃薯病毒,尤其是马铃薯Y病毒的侵染,显著减轻植物受马铃薯Y病毒感染后的伤害,能够显著减少损失。
主权项:1.一种抗病毒马铃薯植株的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: 以pHSE401为骨架,构建载体,所述载体含有guideRNA,所述guideRNA的核苷酸序列为SeqIDNo.5:ATTTCAGGAGGAGTATAGCAAGG; 将获得的载体转化农杆菌,将筛选出的农杆菌阳性转化子利用农杆菌介导的叶盘转化法转化马铃薯,筛选StPCaP1基因敲除的马铃薯植株; 摩擦接种马铃薯病毒至StPCaP1基因敲除的马铃薯植株,检测其抗病毒能力,得到抗病毒马铃薯植株;步骤(3)中,摩擦接种的病毒为马铃薯Y病毒。
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百度查询: 山东农业大学 一种抗病毒马铃薯植株的制备方法及其应用
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