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一种TJP3基因编码蛋白在制备卵巢癌检测试剂中的应用 

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摘要:本发明属于生物技术领域,公开了一种TJP3基因编码蛋白在制备卵巢癌检测试剂中的应用,通过分析验证在卵巢癌发生发展中的作用,能够为TJP3在卵巢癌的临床诊断、分型、治疗、预后等方面作进一步的深入探索奠定良好的基础。本发明的实验结果表明,TJP3在卵巢癌患者中高表达,在卵巢癌细胞增殖、凋亡和EMT发生中发挥重要作用。有可能成为卵巢癌潜在的、新的生物标志物,本发明有望为卵巢癌的诊断和治疗提供新的、有价值的依据和参考。同时,本发明的实验结果明确了TJP3高表达促进卵巢癌细胞增殖活力、细胞迁移以及细胞侵袭、抑制细胞凋亡的生物学功能,说明TJP3在卵巢癌细胞发生发展中具有明确的生物学功能。

主权项:1.一种编码蛋白功能测定方法,其特征在于,所述编码蛋白功能测定方法包括:步骤一,检测TJP3蛋白在正常卵巢上皮细胞及上皮性卵巢癌细胞株中mRNA和蛋白质的表达水平;步骤二,构建敲降和过表达稳转细胞系;步骤三,进行TJP3蛋白对卵巢癌Caov-3细胞增殖活力影响的检测;步骤四,进行TJP3蛋白对卵巢癌Caov-3细胞迁移和侵袭影响的检测;步骤五,进行TJP3蛋白对卵巢癌Caov-3细胞EMT相关蛋白表达的检测;步骤六,进行TJP3蛋白对卵巢癌Caov-3细胞凋亡影响的检测;所述步骤二中的构建敲降和过表达稳转细胞系的方法包括:敲降载体GV248、GV248-TJP3以及过表达载体GV365、GV365-TJP3转入Caov-3细胞,分别与野生型细胞组成两个实验组;将转染后的细胞用嘌呤霉素选择压力持续筛选3周,并从mRNA水平和蛋白质水平来验证所获得的稳转细胞株是否稳定表达TJP3蛋白,进而用于分析TJP3蛋白对卵巢癌Caov-3细胞增殖活力影响、对卵巢癌Caov-3细胞迁移和侵袭影响、对卵巢癌Caov-3细胞EMT相关蛋白表达以及对卵巢癌Caov-3细胞凋亡影响。

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