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制备病毒载体的手段和方法及其用途 

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摘要:提供了制备和纯化病毒颗粒的方法,以及包含所述病毒颗粒的组合物和用途。

主权项:1.一种包含AAV9病毒载体的药物组合物,所述AAV9病毒载体包含编码运动神经元存活SMN蛋白的多核苷酸,所述AAV9病毒载体根据制备AAV病毒载体的方法制备,所述方法包括以下步骤:a.培养粘附细胞;b.用一种或多种质粒转染所述粘附细胞以能够产生所述AAV病毒载体;c.裂解所述粘附细胞以分离所述AAV病毒载体;d.酸化和澄清c的细胞裂解物;e.使用阳离子交换色谱CEX纯化d的产物;f.使用切向流过滤TFF过滤e的产物;g.在氯化铯CsCl缓冲液中超速离心f的产物;以及h.从g的产物中收集所述AAV病毒载体,其中所述药物组合物包含少于约7%的空病毒衣壳。

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