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摘要：本发明公开了一种猴痘病毒核酸检测试剂盒，包括核酸提取液、PCR检测液、质控提取过程的内控对照、阴性对照和阳性对照，PCR检测液包含上游引物、下游引物和预混液，上游引物和下游引物用于靶多核苷酸扩增，预混液用于靶多核苷酸检测并且包括引物探针、扩增酶、UNG酶、Mg2+和Tris缓冲液。本发明公开的一种猴痘病毒核酸检测试剂盒，其减少整个检测提取的时间，又浓缩了核酸样本浓度，减少操作步骤的同时又保持产品的准确度和灵敏度。
主权项：1.一种猴痘病毒核酸检测试剂盒，其特征在于，包括核酸提取液、PCR检测液、质控提取过程的内控对照、阴性对照和阳性对照，PCR检测液包含上游引物、下游引物和预混液，上游引物和下游引物用于靶多核苷酸扩增，预混液用于靶多核苷酸检测并且包括引物探针、扩增酶、UNG酶、Mg2+和Tris缓冲液，其中：核酸提取液的成分包括0.01MTris-Cl缓冲液、0.008-0.012gmLTriton-X，以及含量为5-20mgmL的氧化硅磁性微球；试剂盒的检测方法具体实施为以下步骤：步骤S1：取n+2个合适1.5mL离心管加入500μL的核酸提取液和5μL的内控对照，然后分别加入100-150μL的阴性对照、阳性对照、样本拭子液；步骤S2：盖好管盖，短暂离心，将离心管放在80℃恒温中孵育5min，然后室温放置5min；步骤S3：离心管放在磁力架上静置1-2min，使氧化硅磁性微球吸附到磁力架一边，移液器靠近另一侧吸去液体；步骤S4：用移液枪吸取50μL检测液到步骤S3的离心管中；步骤S5：振荡混匀后放入荧光定量PCR仪进行扩增检测，PCR扩增条件：50℃×5min；95℃×2min；再按95℃×15s；60℃×45s循环40次；荧光检测在60℃；反应体系为50μL。
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百度查询： 浙江大学绍兴研究院 一种猴痘病毒核酸检测试剂盒
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