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摘要：本发明涉及酵母菌基因工程技术和蛋白表达技术领域，提供了一种基于PET水解酶DuraPETase重组DNA的高效表达载体，以及利用该载体在毕赤酵母GS115工程菌株中高效表达目的基因的方法。该方法包含以下方面：保存和培养菌株，分析蛋白质可行性并构建载体，克隆目的基因并制备重组质粒，制备大肠杆菌和毕赤酵母的感受态细胞并进行转化，以及对表达的蛋白进行鉴定。
主权项：1.一种用于DuraPETase蛋白高效表达的重组毕赤酵母GS115工程菌株的构建方法，其特征在于：包含有材料的准备与方法及结果分析；下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。所述材料的准备包含有菌株的保存与培养、试剂的配置；所述方法包含有以下步骤：S100、蛋白质可行性分析；S101、构建载体，目的基因的克隆与重组质粒；S102、大肠杆菌感受态的制备；S103、大肠杆菌感受态的转化；S104、毕赤酵母电转感受态的制备；S105、毕赤酵母感受态电击转化；S106、蛋白表达、纯化与鉴定；S107、蛋白鉴定；S108、结果与分析；S109、蛋白表达鉴定，从而得出蛋白可以表达。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南京农业大学 一种用于DuraPETase蛋白高效表达的重组毕赤酵母GS115工程菌株
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