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摘要：本发明公开了一种结直肠癌类器官培养基及无支架3D培养方法，涉及生物技术领域，本发明公开了一种结直肠癌类器官培养基及无载体支架支持下三维结直肠癌肿瘤类器官细胞球培养方法。本发明的培养基针对结直肠癌患者组织来源细胞的培养生长特点，选用了多种细胞因子成份按照优化比例配制而成，其组分简单合理，营养丰富。本发明方法在不引入外源性支撑材料的前提下，实现了结直肠癌肿瘤类器官的构建及培养，成功率可达90%以上，能够有效保持原代肿瘤细胞特异性，并可长期维持肿瘤细胞活力和功能性高表达，可为体外药物敏感性检测、新药研发及疾病相关机制研究提供理想模型。
主权项：1.一种结直肠癌类器官培养基无支架3D培养方法，其特征在于，至少包括以下方法步骤：S01、将经消化分离的原代肿瘤细胞直接接种至超低吸附的细胞培养孔板中；S02、加入结直肠癌类器官培养基；S03、每隔2～3天更换一次培养基，培养至形成类器官；其中，结直肠癌类器官培养基成分由：0.5-2%青霉素、0.5-2%链霉素、5-20μMROCK1抑制剂、5-20μMMAPK抑制剂、0.5-1μMALK-5抑制剂、0.2-1μgmLR-Spondin-1、1-3%HEPES、0.5-3%GlutaMAX、1-3%B-27、0.5-2%N-2、0.01-0.1μgmLEGF、0.05-0.5μgmLNoggin、5-50nM胃泌素GastrinⅠ、余量均为AdvancedDMEMF12基础培养基组成。
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