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摘要:本发明中公开了一种基于副流感病毒5型L株PIV5‑L的Cas9表达载体,所述Cas9表达载体为重组质粒pB‑L‑Cas9HN‑L,序列如SEQIDNO.73所示。本发明同时公开了一种基于副流感病毒5型L株PIV5‑L的L‑CRISPRCas9系统,包含靶向目标基因的sgRNA和上述的Cas9表达载体。本发明还公开了上述L‑CRISPRCas9系统在构建基因敲除细胞中的应用。本发明构建的基于PIV5‑L的Cas9表达载体可以实现Cas9蛋白的有效表达;构建的L‑sgRNA‑Cas9、L‑GFP‑sgRNA‑Cas9一体化系统可以实现对sgRNA和Cas9基因组成的整个CRISPR系统的高效递送和表达,从而实现对靶细胞目标基因的敲除或敲低效果。
主权项:1.一种基于副流感病毒5型L株PIV5-L的Cas9表达载体,其特征在于,所述Cas9表达载体为重组质粒pB-L-Cas9HN-L,序列如SEQIDNO.73所示。
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百度查询: 复旦大学 一种基于副流感病毒5型L株PIV5-L的L-CRISPR/Cas9系统及应用
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