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摘要：本发明涉及灵芝绿茶胶囊分析技术领域，且公开了灵芝绿茶胶囊的HPLC指纹图谱研究及多成分含量分析方法，通过比对灵芝绿茶供试品溶液和混合对照品溶液，共计指认8种成分，分别为表没食子儿茶素、儿茶素、灵芝酸C2、灵芝酸A、灵芝烯酸D、灵芝酸D、灵芝酸F、灵芝酸G。该灵芝绿茶胶囊的HPLC指纹图谱研究及多成分含量分析方法，采用高效液相色谱法将样品进样分析，使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件制作指纹图谱并进行相似度评价，结合CA、PCA、OPLS‑DA对灵芝绿茶胶囊样品进行质量评价，建立了灵芝绿茶胶囊HPLC指纹图谱，结合化学模式识别分析方法对数据进行综合分析，完成对灵芝绿茶胶囊中表没食子儿茶素、灵芝酸C2、灵芝酸A的定量分析。

主权项：1.灵芝绿茶胶囊的HPLC指纹图谱研究及多成分含量分析方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、制备溶液S101、分别称取表没食子儿茶素、儿茶素、灵芝酸C2、灵芝酸G、灵芝酸A、灵芝烯酸D、灵芝酸D以及灵芝酸F，分别加入甲醇对其进行充分溶解，并将其定容至刻度线，摇晃均匀，得到具有特定质量浓度的对照品溶液；S102、将灵芝绿茶提取物样品研细，精密称取，置锥形瓶中，精密加入甲醇溶液，称重，超声处理30min，放冷，再次称重，用甲醇溶液补足减失的量，摇匀，滤过，滤液用0.45μm微孔滤膜滤过，得到供试品溶液；S103、根据灵芝绿茶胶囊处方组成，分别制备灵芝和绿茶的单味药样品，按照步骤S102中供试品制备方法制成各单味药样品溶液；S2、建立HPLC指纹图谱S201、精密度、重复性、稳定性试验按照试验规定，选取试验目标溶液，并设定合适的进样程序，以表没食子儿茶素作为参照峰，筛选相关数据来计算共有峰RSD值，并记录入表；S202、建立指纹图谱及相似度评价取10批灵芝绿茶供试品溶液，按照色谱条件进样测定，记录色谱图，将10批样品色谱图中峰面积106的色谱峰筛选掉后导入中药色谱指纹图谱相似度评价软件，以S9为参照图谱，采用中位数法，时间宽度设为0.1，多点校正，自动峰匹配，生成对照指纹图谱R，依照色谱条件，取用步骤S1中的各样品溶液进行进样分析，并绘制出色谱图，通过对10批样品的指纹图谱色谱峰进行标定，识别出共有峰；S3、化学模式识别分析S301、聚类分析CA将步骤S202识别出的共有峰面积作为变量，导入IBMSPSSStatistics27软件，采用组间联接法，并以平方欧氏距离为测度进行CA；S302、主成分分析PCA通过数据降维手段将相关变量转化为线性不相关变量，减少变量数量，以提高分析效率，将步骤S202识别出的10批灵芝绿茶胶囊样品的共有峰面积导入IBMSPSSStatistics27软件进行PCA，并将结果输出记录，再将共有峰面积为变量导入SIMCA软件，直观体现样品批次间特征分布情况，并记录；S303、正交偏最小二乘法-判别分析OPLS-DA将步骤S202识别出的10批灵芝绿茶胶囊样品的共有峰面积导入SIMCA软件进行OPLS-DA；S4、多成分含量测定S401、混合对照品溶液的制备分别精密称取表没食子儿茶素、灵芝酸C2、灵芝酸A标准品适量，置于同一10mL容量瓶内，加甲醇溶解、定容，摇匀，得到表没食子儿茶素、灵芝酸C2、灵芝酸A的混合对照品溶液；S402、线性关系考察将步骤S401中制备的对照品溶液进样分析，以对照品浓度为横坐标x，峰面积为纵坐标y，进行线性回归考察，得到结果记录入表；S403、精密度、重复性、稳定性考察根据试验的具体要求，确定试验所需的目标溶液，并设定进样程序，在计算共有峰RSD值时，以表没食子儿茶素作为参照峰，选取了相应的数据，将得到结果记录入表；S404、加样回收率试验精密称取6份灵芝绿茶胶囊样品，加入按照样品含量100％比例的表没食子儿茶素、灵芝酸A、灵芝酸C2，遵循步骤S102所描述的方法，制备供试品溶液，并进样分析，得到加样回收率的具体数值，并记录入表；S405、样品含量测定将10批灵芝绿茶胶囊样品按照步骤S102方法制成供试品溶液，在色谱条件下进样分析，计算各批次样品表没食子儿茶素、灵芝酸C2、灵芝酸A含量，并记录入表；S5、结果讨论分析针对步骤S1至S4的方法，对得到的数据进行分析。

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