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摘要:本发明提供了一种同时检测血液样品中5种皮质激素的方法,所述5种皮质激素分别为皮质醇、可的松、皮质酮、21‑脱氧皮质醇和11‑脱氧皮质醇;该方法先采用蛋白沉淀及加入特定的缓冲液等步骤将血液样品进行前处理,然后采用高效液相色谱串联质谱法对目标样品溶液进行检测,通过内标法建立标准曲线计算5种皮质激素在血液中的含量。该检测方法具有检测灵敏度高,高通量、简便快捷,检测效率高等优点,能够同时检测血液中的皮质醇、可的松、皮质酮、21‑脱氧皮质醇、11‑脱氧皮质醇,并进行精确的定性和定量分析,降低了临床应用及科研成本,具有较高的应用价值。
主权项:1.一种同时检测血液样品中5种皮质激素的方法,其特征在于,所述5种皮质激素分别为皮质醇、可的松、皮质酮、21-脱氧皮质醇和11-脱氧皮质醇;所述方法包括如下步骤:1对待测血液样品进行前处理,得到目标样品溶液;2采用高效液相色谱串联质谱对所述目标样品溶液进行检测,得到血液样品中5种皮质激素的含量;其中,所述对待测血液样品进行前处理具体包括:收集待测血液样品,加入内标溶液,涡旋振荡,加入沉淀剂,涡旋混匀,离心,取上清液,加入缓冲液,混匀,即得目标样品溶液;所述沉淀剂为甲醇、乙腈或甲醇与乙腈的混合溶液甲醇、乙腈体积比为1:1-7:43;所述缓冲液为氨水-乙酸铵溶液,氨水-乙酸铵溶液中,乙酸铵浓度为0.5-1.5mmolL,氨水浓度为0.01%-0.02%,%为质量百分数,pH为8.2-9.8;所述高效液相色谱的条件为:色谱柱:Waters,BEHC18柱;柱温40℃;进样器温度4℃;以流动相A和流动相B进行梯度洗脱,所述流动相A为0.5mmolL乙酸铵水溶液,所述流动相B为甲醇,所述梯度洗脱的参数为:0min,流动相B:55%;0-1.3min,流动相B:由55%升至65%;1.3-1.6min,流动相B:由65%升至95%;1.6-1.7min,流动相B:由95%降至55%;1.7-2.5min,流动相B:55%;流速为0.3mLmin;进样量2μL。
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