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使用3'烯丙基封端的核苷酸的测序方法 

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摘要:本公开的实施方案涉及具有3'烯丙基封端基团的核苷酸。本文还提供了使用本文所述的具有3'烯丙基封端基团的核苷酸进行测序的方法以及测序试剂盒。

主权项:1.一种平行确定多个不同的靶多核苷酸的序列的方法,所述方法包括:a使固体载体与包含测序引物的溶液在杂交条件下接触,其中:i所述固体载体包含至少5,000,000个在空间上可区分的位点cm2,所述位点包含靶多核苷酸的多个拷贝;ii所述固体载体包含多个不同的靶多核苷酸;并且iii所述测序引物与所述不同的靶多核苷酸的至少一部分互补;b使所述固体载体与包含DNA聚合酶的水性溶液和核苷酸A、G、C和T或U在适用于DNA聚合酶介导的引物延伸的条件下接触,其中每种核苷酸包含具有与3'氧原子附接的3'烯丙基封端基团的2'脱氧核糖部分;c使所述固体载体成像以确定所掺入的核苷酸的身份;d使所述固体载体与包含钯催化剂和三羟烷基膦的水性解封端溶液在适于从所掺入的核苷酸中化学除去3'烯丙基封端基团从而暴露3'-OH基团以用于在所述固体载体上进行进一步核苷酸掺入的条件下接触;e使所述固体载体与水性洗涤溶液接触;以及f重复步骤b至e以确定靶多核苷酸序列。

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百度查询: 伊路米纳有限公司 使用3'烯丙基封端的核苷酸的测序方法

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