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超长景深的反射式扫描超分辨光学显微系统及方法 

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摘要:本发明公开了一种超长景深的反射式扫描超分辨光学显微系统及方法,系统包括样品位移模块、光学显微成像模块、环形聚焦光束产生模块、光束扫描模块、超分辨聚焦照明与收集模块、超分辨光学成像模块和计算机。通过利用环形聚焦光束照明、传统物镜聚焦效率高、光束扫描速度快的优势,实现高效的超长焦深超分辨聚焦照明,进而能采用传统光学透镜实现快速的超长景深超分辨光学显微成像。本发明可应用于生物样品的非标记超分辨显微快速成像,也可以应用于工业相关超分辨显微检测等领域。

主权项:1.一种超长景深的反射式扫描超分辨光学显微系统,其特征在于,包括:样品位移模块,用于带动样品(16)移动;光学显微成像模块,用于对样品(16)进行宽场成像,确定超分辨扫描成像区域;环形聚焦光束产生模块,用于产生环形聚焦光束,该环形聚焦光束产生模块沿着光线传播方向依次包括光源模块、第一线偏振片(4)、锥透镜(5)、第一正透镜(6)、第二正透镜(7)和第三正透镜(8),其中第一正透镜(6)与锥透镜(5)同轴间隔放置,第二正透镜(7)的前焦平面与第一正透镜(6)的后焦平面重合,第二正透镜(7)的后焦平面与第三正透镜(8)的前焦平面重合,第二正透镜(7)与第三正透镜(8)构成第一4f系统;光源模块产生准直激光束,该准直激光束经过第一线偏振片(4)、锥透镜(5)和第一正透镜(6)后形成线偏振环形聚焦光束,并在第一正透镜(6)的后焦平面上形成圆形聚焦线;光束扫描模块,其包括光束扫描振镜(9)、光束扫描透镜(10)、第一套筒镜(11)和反射镜(12),其中光束扫描振镜(9)的中心位置与第三正透镜(8)的后焦平面重合;光束扫描透镜(10)的前焦平面位于光束扫描振镜(9)的中心位置;光束扫描透镜(10)的后焦平面与第一套筒镜(11)的前焦平面重合,两者构成第二4f系统;第一套筒镜(11)的后焦平面经过反射镜(12)反射后与超分辨聚焦照明与收集模块中物镜(15)的后焦平面重合;光束扫描振镜(9)含有控制器,控制器用于与计算机连接,计算机通过光束扫描振镜(9)的控制器控制光束扫描振镜(9)进行二维振动扫描;超分辨聚焦照明与收集模块,用于将环形聚焦光束转化为超分辨锥形聚焦光束,形成超长焦深超分辨焦斑对样品(16)进行照明,收集由样品(16)在焦深范围内的反射和散射产生的超分辨信号光,并聚焦、偏振转化;该超分辨聚焦照明与收集模块包括四分之一波片(13)、轴向纳米定位器(14)和物镜(15),样品(16)位于物镜(15)的前焦平面前后的超长焦深范围内;超分辨光学成像模块,用于获取经准直、偏振转化后的超分辨信号光,并将其转换为电信号;该超分辨光学成像模块还包括偏振分束器(19)、第二线偏振片(20)、第二套筒镜(21)、光纤头(22)、光电倍增管(25)和高速采集卡(27);偏振分束器(19)位于第一线偏振片(4)和锥透镜(5)之间,所述偏振分束器(19)、第二线偏振片(20)、第二套筒镜(21)和光纤头(22)沿光线经偏振分束器(19)反射后的传播方向依次设置,且光纤头(22)的前端面与第二套筒镜(21)的后焦平面重合,光纤头(22)与光电倍增管(25)连接,光电倍增管(25)与高速采集卡(27)连接,高速采集卡(27)用于与计算机连接;计算机,用于控制样品位移模块带动样品(16)移动,通过同步控制光束扫描振镜(9)扫描和接收超分辨光学成像模块输出的电信号,并处理得到超分辨扫描成像区域内样品的超分辨显微图像。

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