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摘要:本申请涉及用于边合成边测序的组合物和方法。核苷酸的封端基团可以通过过渡金属催化剂去除,该过渡金属催化剂由非还原配体和还原剂活化。
主权项:1.一种用于确定多种靶多核苷酸的序列的方法,所述方法包括:a使固体载体在杂交条件下与测序引物接触,其中所述固体载体包含多种固定在其上的靶多核苷酸;并且所述测序引物与所述靶多核苷酸的至少一部分互补;b在适合于DNA聚合酶介导的引物延伸的条件下,使所述固体载体与第一水溶液接触,所述第一水溶液包含DNA聚合酶和四种不同类型的核苷酸中的一种或多种类型的核苷酸,其中所述核苷酸中的每种核苷酸包含3'封端基团,所述3'封端基团包含未取代的或取代的烯丙基基团;c将一种类型的核苷酸掺入到所述测序引物中以产生延伸的拷贝多核苷酸;d对所述延伸的拷贝多核苷酸执行一次或多次荧光测量;e在包含过渡金属催化剂和一种或多种还原剂的第二水溶液中去除所掺入的核苷酸的所述3'封端基团,所述过渡金属催化剂由具有水溶性非还原膦或N,N-双齿非膦配体的钯或镍络合物产生,并且其中所述一种或多种还原剂包括含硼还原剂;以及f在去除所掺入的核苷酸的所述3'封端基团之后,用第三水溶液对所述固体载体进行洗涤。
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权利要求:
百度查询: 伊路米纳有限公司 用于边合成边测序的过渡金属催化剂组合物和方法
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