买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

摘要：本发明公开了一种β‑1,3‑葡聚糖混合发酵方法，包括以下步骤：1发酵，制得发酵液；2提取，将步骤1制得的发酵液离心后去除杂质，加入乙醇提取β‑1,3‑葡聚糖，乙醇和发酵液的体积比为2.5:1；3干燥，粉碎，包装，获得β‑1,3‑葡聚糖成品。本发明根据在发酵培养基中先加入碱式粪产杆菌进行发酵产β‑1,3‑葡聚糖，发酵过程中粘度会增大，粘度增大会降低β‑1,3‑葡聚糖产量，当粘度达到一定值后，加入酿酒酵母菌，控制溶氧使其产乙醇。其中乙醇可以降低料液粘度，提高传质，实时控制营养液添加速度和添加量，从而提高β‑1,3‑葡聚糖单批次产量，同时节省后期沉降用乙醇用量。

主权项：1.一种β-1,3-葡聚糖混合发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：1发酵，将发酵培养基加入发酵罐并灭菌，然后将碱式粪产杆菌培养液加入发酵罐，发酵培养基和碱式粪产杆菌培养液的总加入量为发酵罐工作容积的65％-70％，在温度为32℃、转速为600rpm、罐压为0.06MPa、pH为6.8，通风比为1-1.5:1的条件下发酵；发酵过程在线检测发酵液粘度，当粘度大于6000mpa·s时，补加酿酒酵母菌培养液，待粘度为10500-11000mpa·s时，溶氧量降低至3-4，刺激酿酒酵母菌产生乙醇，待粘度降低至8000-8500mpa·s，提高供氧量至溶氧量为10以上，碱式粪产杆菌产生β-1,3-葡聚糖；发酵过程使用红外光谱仪检测发酵菌菌浓，控制发酵菌菌浓为80-120gL；待发酵液中β-1,3-葡聚糖的浓度为60gL以上时，开始进行带放发酵，放出发酵液体积的30％，补加营养液，待发酵菌菌浓高于120gL停止补加营养液；待发酵液溶氧量在10分钟以内上升500％以上，且pH上升0.2-0.5时，发酵结束，制得发酵液；2提取，将步骤1制得的发酵液在转速为4000rpm下离心20-30min,去除沉淀，上清发酵液加入乙醇提取β-1,3-葡聚糖，乙醇和上清发酵液的体积比为2.5:1,搅拌后静置20-30min,进行离心分离，得β-1,3-葡聚糖；3干燥，粉碎，包装，获得β-1,3-葡聚糖成品；步骤1所述碱式粪产杆菌培养液的制备方法如下：1一级种子培养，将碱式粪产杆菌液和一级种子培养基加入一级种子罐中，碱式粪产杆菌液和一级种子培养基的体积比为2:100，碱式粪产杆菌液的菌体浓度为45-55gL，在温度为32℃、转速为200rpm的条件下培养12h，获得一级种子液；2二级种子培养，将步骤1获得的一级种子液和二级种子培养基加入二级种子罐中，接种量为5％，在温度为32℃、转速为600rpm、罐压为0.06MPa、pH为6.5,通风比为1.2:1的条件下培养10-13h，待溶氧量在10分钟以内上升300％以上时，获得碱式粪产杆菌培养液；步骤1所述酿酒酵母菌培养液的制备方法如下：将酿酒酵母菌和酿酒酵母菌培养基加入种子罐中，每1L酿酒酵母菌培养基加入2mL酿酒酵母菌菌液,菌浓为5-8gL，在32℃的条件下培养20-25h，得到酿酒酵母菌培养液。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 山东福洋生物制造工程研究院 一种β-1,3-葡聚糖混合发酵方法