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摘要：本发明公开一种灰毡毛忍冬开花的调控基因及其应用，涉及植物基因工程技术领域，该灰毡毛忍冬开花的调控基因为AGL82，其基因序列如SEQIDNO.1所示；所述调控基因的编码蛋白质的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示；调控基因能够通过RNA提取及反转录进行克隆；所述调控基因用于调控灰毡毛忍冬开花期，用于植物过表达载体的构建，该调控基因能够促进灰毡毛忍冬提前开花；提供了灰毡毛忍冬花器官发育相关的AGL82基因及其编码蛋白序列，以及制备AGL82基因的方法和制备过程中所需的引物，并通过AGL82基因过表达载体的成功构建、遗传转化拟南芥等技术手段验证了AGL82基因可促进植物开花的功能。

主权项：1.一种促进灰毡毛忍冬开花的基因，其特征在于；所述基因为AGL82，其基因序列如SEQIDNO.1所示；所述基因的编码蛋白质的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示；所述基因能够通过RNA提取及反转录进行克隆；所述基因进行克隆的方法包括如下步骤：第一：以灰毡毛忍冬为材料，提取RNA，并将提取的RNA进行反转录生成cDNA第一链，作为PCR扩增的模板；第二：将获得的灰毡毛忍冬AGL82基因进行序列分析并设计PCR反应引物；第三：以灰毡毛忍冬cDNA第一链为模板，采用AGL82PCR反应引物进行PCR扩增，PCR扩增产物进行1.0%琼脂糖凝胶电泳，并按琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒回收PCR产物；回收PCR产物与pTOPO载体连接并转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞，挑取阳性克隆并测序；所述PCR反应引物为LmAGL82-F，其引物序列为：ATGGGACGAGCTAGAGTCAGAA；所述PCR反应引物为LmAGL82-R，其引物序列为：CATGGCTAATCAGTAATTAATTGAAC；所述PCR扩增的反应体系为：2×PhantaMaxBuffer12.5μL，dNTPMix0.5μL，SVP-F和SVP-R各1μL，PhantaMaxSuper-FidelityDNAPolymerase0.5μL，cDNA模板1.5μL，ddH2O8.0μL；PCR反应程序为：95℃预变性3min；95℃变性15s，60℃退火15s，72℃延伸1min，35个循环；72℃彻底延伸5min；12℃持续。

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百度查询： 湖南省林业科学院 中南林业科技大学 灰毡毛忍冬开花的调控基因及其应用