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摘要:本发明公开了一种高通量血管化肝脏类器官模型及其构建方法,所述方法包括:获得高通量血管化肝脏类器官培养芯片,包括:设于细胞培养板内的集成式微孔组件,从上到下依次包括:下储液层,多孔薄膜层,穿孔微阵列培养层,微孔的深度0.5mm~5mm,相邻两个微孔的距离10μm~1mm,微孔的倾斜角30°~90°;上储液层,具有两个侧培养基储液通孔和中间培养基储液通孔,所述两个侧培养基储液通孔和下储液层相连通形成培养基灌流通道,所述穿孔微阵列培养层和多孔薄膜层设于中间培养基储液通孔的底部构成血管化肝脏类器官培养腔室;将单个前肠胚细胞接种至所述芯片中培养后置于流体剪切力细胞培养装置上动态培养得到血管化肝脏类器官。
主权项:1.一种高通量血管化肝脏类器官模型的构建方法,其特征在于,所述方法包括:获得高通量血管化肝脏类器官培养芯片,包括:细胞培养板和设于所述细胞培养板内的集成式微孔组件,所述集成式微孔组件从下到上依次包括:下储液层,具有下层通孔;多孔薄膜层,设于所述下储液层的中部上表面,所述多孔薄膜层表面分布有微纳尺寸的孔,用于上下储液池流体交换,所述多孔薄膜层为多孔膜,包括PDMS、PMMA、PC、PI或PET多孔膜中的至少一种,所述多孔膜的孔隙大小为0.1~8μm,孔隙率为1×105~4×108孔cm2,厚度为5~20μm;穿孔微阵列培养层,具有多个均匀分布穿孔微孔,用于血管化肝脏类器官培养;每个微孔的深度为0.5mm~5mm,相邻两个所述微孔之间距离为10μm~1mm,微孔的倾斜角在30°~90°之间;上储液层,具有两个侧培养基储液通孔和中间培养基储液通孔,所述两个侧培养基储液通孔和所述下储液层的所述下层通孔相连通形成培养基灌流通道,所述穿孔微阵列培养层和所述多孔薄膜层设于所述中间培养基储液通孔的底部,构成血管化肝脏类器官培养腔室;获得前肠胚细胞并消化成单个前肠胚细胞;将所述单个前肠胚细胞接种至所述高通量血管化肝脏类器官培养芯片的所述穿孔微阵列培养层中培养,获得肝脏类器官;后置于流体剪切力装置上进行动态培养,得到所述血管化肝脏类器官。
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百度查询: 武汉大学 一种高通量血管化肝脏类器官的培养芯片、血管化肝脏类器官模型及其制备方法
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