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申请/专利权人:张亚青
申请日:2023-06-08
公开(公告)日:2025-01-21
公开(公告)号:CN119343450A
专利技术分类:...适体(aptamers),即与靶分子特异性、高亲和力结合,但不与其杂交的核酸[2010.01]
专利摘要:本发明提供了一种从RNA库中筛选适配体的方法。该方法收集每次洗脱的洗脱液同时结合特定的洗脱程序,从而实现既不丢失RNA适配体的任何信息,又具有低假阳性率,筛选出的适配体结合能力强、文库制备时间短、可以仅作一轮富集、文库制备可重复性高且适用自动化机械臂等技术效果。
专利权项:一种筛选RNA适配体的方法,所述方法包括以下步骤:1提供待筛选的RNA适配体文库;2将步骤1的文库与结合有靶标的固体载体温育,进而促使文库中的RNA适配体与靶标充分结合;3利用缓冲液梯度洗脱步骤2中与固体载体上的靶标结合的RNA适配体,分别收集每次洗脱的洗脱液;4完全洗脱步骤3后仍保留在固体载体上的RNA适配体,收集洗脱液作为最后一组的洗脱液;5任选浓缩、纯化步骤3和4中得到的洗脱液中的RNA适配体;6逆转录步骤5中得到的RNA适配体,从而得到cDNA;7对步骤6中得到的cDNA进行扩增和高通量测序,获得测序数据;8分析步骤7得到的测序数据,根据RNA适配体候选序列的结合潜力从高到低排序,从而得到高亲和力的RNA适配体序列。
百度查询: 张亚青 一种筛选RNA适配体的方法
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