恭喜华南理工大学王菊芳获国家专利权
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龙图腾网恭喜华南理工大学申请的专利一株产丁内酰胺的重组大肠杆菌及其构建方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119351299B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411929834.0,技术领域涉及:C12N1/21;该发明授权一株产丁内酰胺的重组大肠杆菌及其构建方法与应用是由王菊芳;李洋;傅宏鑫设计研发完成,并于2024-12-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本一株产丁内酰胺的重组大肠杆菌及其构建方法与应用在说明书摘要公布了:本发明属于微生物和发酵工程领域,公开了一株产丁内酰胺的重组大肠杆菌及其构建方法与应用。本发明通过分子生物学技术,构建调控中心碳代谢途径的动态分子开关,使得重组大肠杆菌实现从葡萄糖到丁内酰胺的直接合成。与现有技术相比,本发明不仅提供了一种从头合成丁内酰胺的方法,同时也规避了化学合成与体外多酶催化带来的复杂生产工业、昂贵前体物质或者辅因子添加等问题。因此,本发明生产工艺简单、安全、绿色,同时丁内酰胺的产量也达到较高水平,是一种具有工业化制备前景的方法。
本发明授权一株产丁内酰胺的重组大肠杆菌及其构建方法与应用在权利要求书中公布了:1.一株产丁内酰胺的重组大肠杆菌,其特征在于:所述的产丁内酰胺的重组大肠杆菌为具有特征(1)、特征(2)、特征(4)和特征(6)的重组菌株E,或是具有特征(1)、特征(2)、特征(4)、特征(5)和特征(6)的重组菌株F;(1)过表达异柠檬酸脱氢酶、L-谷氨酸脱氢酶、L-谷氨酸脱羧酶突变体GadBΔ452-466E89Q和β-丙氨酸辅酶A转移酶;(2)敲除乳酸脱氢酶ldhA、丙酮酸脱氢酶poxB、醇醛脱氢酶adhE、磷酸转乙酰酶pta;(4)敲除异柠檬酸裂解酶aceA;(5)敲除γ-氨基丁酸氨基转移酶gabT和puuE;(6)过表达温度敏感型调控子cI857、失活的dCas9蛋白、靶向α-酮戊二酸脱氢酶sucA基因的单链向导RNA、靶向dCas9基因的单链向导RNA、外壳蛋白、转录激活因子soxS突变体soxSR93A和支架RNA;其中,异柠檬酸脱氢酶的氨基酸序列如GenBank中登录号为WP_000444484的序列所示;L-谷氨酸脱氢酶的氨基酸序列如GenBank中登录号为WP_000373021.1的序列所示;L-谷氨酸脱羧酶突变体GadBΔ452-466E89Q的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示;β-丙氨酸辅酶A转移酶的氨基酸序列如GenBank中登录号为WP_066047836.1的序列所示;失活的dCas9蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示;温度敏感型调控子CI857的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示;外壳蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示;转录激活因子soxS突变体soxSR93A的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示;靶向α-酮戊二酸脱氢酶sucA基因的单链向导RNA的核苷酸序列如SEQIDNO.16所示;靶向dCas9基因的单链向导RNA的核苷酸序列如SEQIDNO.17所示;支架RNA的核苷酸序列如SEQIDNO.18所示。
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