恭喜袁隆平农业高科技股份有限公司牛建行获国家专利权
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龙图腾网恭喜袁隆平农业高科技股份有限公司申请的专利一种玉米单倍体幼胚组培加倍的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117136840B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311087286.7,技术领域涉及:A01H1/08;该发明授权一种玉米单倍体幼胚组培加倍的方法是由牛建行;梁燕丽;张义海;史春辉设计研发完成,并于2023-08-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种玉米单倍体幼胚组培加倍的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种玉米单倍体幼胚组培加倍的方法,包括如下步骤:S1配置液态加倍培养基,分别取MS盐、蔗糖、NAA、氯化钙、二甲基亚砜在DDH2O中进行混合搅拌直至溶解,依序进行ph酸性调节、灭菌处理及冷却处理,加入秋水仙碱并混匀,将混匀液分装至培养皿中形成液态加倍培养基,并使培养皿保持在遮光环境中;S2接种加倍,每份液态加倍培养基,剥离出相应数量的玉米单倍体幼胚置于同一滤纸上,将该滤纸浸泡入液态加倍培养基中进行加倍处理。采用本发明的方法能够缩短接种幼胚的时间,只需要将幼胚浸泡入液态培养基中,1min即可完成5000幼胚的接种工作,降低人工和仪器成本。其次采用浸泡处理的方式,幼胚能够更充分的接触秋水仙碱,提高加倍率。
本发明授权一种玉米单倍体幼胚组培加倍的方法在权利要求书中公布了:1.一种玉米单倍体幼胚组培加倍的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、配置液态加倍培养基,分别取MS盐、蔗糖、NAA、氯化钙、二甲基亚砜在DDH2O中进行混合搅拌直至溶解;对溶解液依序进行ph酸性调节、灭菌处理及冷却处理,加入过滤后的秋水仙碱并混匀;将混匀液分装至相应的培养皿中以形成液态加倍培养基,并使培养皿保持在遮光环境中;S2、接种加倍,对于每份液态加倍培养基,先剥离出相应数量的玉米单倍体幼胚共同置于同一滤纸上,再将该滤纸浸泡入经由S1配制出的液态加倍培养基中,以对玉米单倍体幼胚进行加倍处理,记录接种幼胚所需的时间和培养基量;在步骤S1中,将培养基放置在无菌操作台上再进行混匀液的分装,所述无菌操作台上设置有能够为培养皿临时遮光的箱体,箱体顶部具有开口,且箱体的开口处可翻转地设置有可封闭其开口的箱盖,箱体内设置有用于承载培养皿的载板,载板上开设有适配于培养皿插置的皿置槽,箱体上设置有动作机构,当箱盖翻转打开时,动作机构能够带动载板朝向箱体顶部开口方向移动;动作机构包括蜗杆,蜗杆贯穿固定在箱盖一侧,且两端分别突出于箱盖侧边,并转动插接在箱体内侧壁的两端,箱体箱壁上转动插设有传动轴,传动轴顶部与蜗杆相配合,底部固定有第一链轮,箱体内底壁上转动插设有筒体,筒体底部伸入箱体的箱壁内、并固定有第二链轮,第一链轮与第二链轮之间通过链条传动相连,筒体顶部螺纹插接有螺杆,螺杆顶部固定在载板底部,载板底部开设有限位槽,限位槽中滑动卡设有与螺杆平行的限位杆,限位杆底部固定在箱体内底壁上,限位杆数量与皿置槽位置和数量相对应;当箱盖翻转打开时会通过蜗杆带动蜗轮、传动轴、第一链轮转动,第一链轮通过链条带动第二链轮、筒体转动,使筒体与螺杆之间相互螺纹作用,并在限位杆和限位槽的限位作用下,使螺杆从筒体中轴向伸出以带动载板朝向箱体顶部开口方向移动;载板上设置自锁机构,自锁机构受驱动于载板朝向远离箱体顶部开口方向移动的作用,能够完成对皿置槽内的培养皿进行锁紧固定;所述自锁机构包括设置于限位杆上的第二齿条,载板底部通过吊板安装有与第二齿条相配合的第一齿轮,载板上滑动插设有与第一齿轮相配合的第一齿条,第一齿条与第二齿条相互平行且分别位于第一齿轮的两侧,第一齿条顶部伸入载板内、并固定有撑臂,撑臂顶部固定有位于皿置槽内的托板,培养皿放置于该托板上,撑臂两侧均设置有第三齿条,载板内关于撑臂相对设置有两个第二齿轮,两个第二齿轮分别与两个第三齿轮相配合,两个第二齿轮上均同轴固定有倾斜延伸至皿置槽内的摆杆,且两个摆杆位于托板的两侧,两个摆杆上均通过弹簧连接有夹板,两个夹板之间形成用于夹持固定住培养皿两侧的夹持空间;当箱盖翻转关闭时,间接使螺杆从筒体中轴向缩入,以带动载板朝向远离箱体顶部开口的方向进行移动,则限位杆通过第二齿条带动第一齿轮转动,使第一齿轮带动第一齿条、撑臂、托板整体下移,使培养皿下移收容在皿置槽中,同时撑臂的下移还可通过第三齿条带动两侧的第二齿轮转动,以使两个摆杆带动两个夹板相互靠近,实现对培养皿两侧的夹持固定;在步骤S1中,MS盐的含量为3.46gL-3.66gL、蔗糖的含量为28gL-33gL、NAA的含量为0.07mgL-0.13mgL、氯化钙的含量为0.45gL-0.53gL、秋水仙碱的含量为0.18gL-0.24gL、二甲基亚砜的含量为18ml-22ml。
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