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恭喜浙江大学林东强获国家专利权

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龙图腾网恭喜浙江大学申请的专利一种分离重组人血白蛋白的两步混合模式层析方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116693659B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-28发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310845363.4,技术领域涉及:C07K14/765;该发明授权一种分离重组人血白蛋白的两步混合模式层析方法是由林东强;蔡青云;葛程童;姚善泾设计研发完成,并于2023-07-11向国家知识产权局提交的专利申请。

一种分离重组人血白蛋白的两步混合模式层析方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种分离重组人血白蛋白的两步混合模式层析方法,属于蛋白质层析分离技术。具体步骤如下:1发酵液预处理,取含有重组人血白蛋白的酵母发酵液,加入辛酸钠,加热去除杂蛋白和灭活蛋白酶,离心分离,取上清液为料液;2第一步混合模式层析,采用2‑1H‑吲哚‑3‑基乙酰基半胱氨酸为配基的介质,上样料液,洗脱收集洗脱液;3第二步混合模式层析,采用4‑氨基‑N‑2‑吡啶基苯磺酰胺为配基的介质,上样条件与第一步洗脱条件一致,收集流穿液,得到重组人血白蛋白。本发明开发了一种两步纯化工艺,采用两种混合模式介质,从酵母发酵液中高效分离重组人血白蛋白,具有分离条件温和、分离效率高、杂质去除率高的特点。

本发明授权一种分离重组人血白蛋白的两步混合模式层析方法在权利要求书中公布了:1.一种分离重组人血白蛋白的两步混合模式层析方法,其特征在于包括如下步骤:1)取含有重组人血白蛋白的酵母发酵液,预处理获得含有重组人血白蛋白的粗品溶液;预处理的方法为:取含有重组人血白蛋白的酵母发酵液,调节pH至6.0,加入辛酸钠至辛酸钠的浓度为10mM,68℃加热30min,迅速冷却至室温,离心取上清液,得到含有重组人血白蛋白的粗品溶液;2)调节重组人血白蛋白粗品溶液的pH至4.0~5.0,过滤后上样到填充有以2-1H-吲哚-3-基乙酰基半胱氨酸为配基的混合模式介质的层析柱中,平衡缓冲液冲洗,洗脱缓冲液洗脱,收集洗脱峰对应的洗脱液;步骤2)使用的混合模式介质的配基密度为100~200μmolL;步骤2)的洗脱缓冲液为添加0.2-0.6MNaCl的磷酸盐缓冲液或者添加0.2-0.6MNaCl的Tris-盐酸缓冲液,pH值为8.0~9.0;3)将步骤2)得到的洗脱液上样到填充有以4-氨基-N-2-吡啶基苯磺酰胺为配基的混合模式介质的层析柱中,平衡缓冲液冲洗,重组人血白蛋白流穿,杂质被吸附,收集流穿液,得到重组人血白蛋白溶液;步骤3)使用的混合模式介质的配基密度为30~100μmolL;步骤3)的平衡缓冲液为添加0.2-0.6MNaCl的磷酸盐缓冲液或者添加0.2-0.6MNaCl的Tris-盐酸缓冲液,pH值为8.0~9.0。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人浙江大学,其通讯地址为:310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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