恭喜肇庆广府万海细胞生物科技有限公司莫芳正获国家专利权
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龙图腾网恭喜肇庆广府万海细胞生物科技有限公司申请的专利一种提高成纤维干细胞活率和分化潜能的培养方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118638723B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-01发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410886482.9,技术领域涉及:C12N5/0775;该发明授权一种提高成纤维干细胞活率和分化潜能的培养方法是由莫芳正;李相鲁;冯馨仪;朱婧设计研发完成,并于2024-07-03向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种提高成纤维干细胞活率和分化潜能的培养方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种提高成纤维干细胞活率和分化潜能的培养方法,属于细胞培养技术领域。本发明提供了一种细胞培养皿,其由氧化石墨烯、纳米硼化锆、二氧化钛等试剂进行细胞培养皿的表面处理,以提高细胞培养皿的生物相容性和细胞粘附性等效果;利用上述细胞培养皿进行成纤维干细胞培养的方法,通过获取成纤维干细胞,并将其转移至细胞培养皿中进行培养、成脂诱导分化。在培养过程中,通过优化培养条件以促进成纤维干细胞的生长和分化,提高成纤维干细胞的活率和分化潜能。
本发明授权一种提高成纤维干细胞活率和分化潜能的培养方法在权利要求书中公布了:1.一种提高成纤维干细胞活率和分化潜能的培养方法,其特征在于,包括培养皿,所述培养皿的制备方法包括以下步骤:A1、于室温搅拌状态下将硼酸、蔗糖加入至醋酸中,升温至75-85℃继续搅拌0.5-1h,冷却,加入正丙醇锆,于55-65℃搅拌3-4h,真空干燥,研磨,得到物料A,将所述物料A于氩气氛围中进行烧制,得到纳米硼化锆;A2、取氧化石墨烯分散液、葡萄糖混合,搅拌,加入氨水,搅拌,于85-95℃搅拌1-2h,加入所述纳米硼化锆、十二烷基磺酸钠,超声分散,于40-50℃水浴搅拌8-10h,过滤,取固相洗涤,干燥,得到物料B;A3、于氮气氛围中:取氯化亚铁四水合物、去离子水混合,加入所述物料B,超声搅拌,于30-40℃水浴搅拌20-30h,真空干燥,得到物料C;A4、取无水乙醇、去离子水、浓硝酸、氨水、硝酸锶混合,加入钛酸丁酯,搅拌,于水热釜中160℃加热2-3h,真空干燥,于450℃煅烧2-3h,研磨,得到物料D;A5、于避光条件下取双酚A丙三醇双甲基丙烯酸酯、双甲基丙烯酸二缩三乙二醇酯、甲基丙烯酸二甲氨乙酯、樟脑醌、物料C、物料D、聚丙烯-graft-马来酸酐相容剂置于高速混合机中混合20-30min,得到混合物料,将所述混合物料涂覆于玻璃皿表面,压整均匀,紫外灯照射固化,即得所述培养皿;还包括培养基,将所述培养基均匀平铺于所述培养皿底部表面,制得细胞培养皿;所述培养基为DMEM培养基;利用所述细胞培养皿进行成纤维干细胞的培养,包括以下步骤:S1、获取成纤维干细胞;S2、将所述成纤维干细胞转移至所述细胞培养皿进行培养;S3、挑选生长良好的所述培养后的成纤维干细胞冻存、复苏、体外成脂诱导分化;步骤A1中,所述硼酸、蔗糖、醋酸、正丙醇锆的配量比为2-3g:2-3g:30-40mL:5-6g;步骤A1中,所述烧制指的是从室温以5℃min升温至800℃保温10-20min,然后以3℃min升温至1200℃保温2-3h,然后以2℃min升温至1500-1600℃保温1-2h,然后以5℃min降温至室温;步骤A2中,所述氧化石墨烯分散液、葡萄糖、氨水、纳米硼化锆、十二烷基磺酸钠的配量比为55-65mL:3.5-3.8g:70-80μL:6-8mg:1-1.2mg;步骤A2中,所述氧化石墨烯分散液的浓度为0.1mmolL;所述氨水的质量浓度为25%;步骤A3中,所述氯化亚铁四水合物、去离子水、物料B的配量比为70-80g:500mL:4-6g;步骤A4中,所述无水乙醇、去离子水、浓硝酸、氨水、硝酸锶、钛酸丁酯的配量比为20-22mL:5-5.5mL:1-1.5mL:17-18mL:0.3-0.5g:4-6mL;所述浓硝酸的浓度为16molL;所述氨水的浓度为14.8molL;步骤A5中,所述双酚A丙三醇双甲基丙烯酸酯、双甲基丙烯酸二缩三乙二醇酯、甲基丙烯酸二甲氨乙酯、樟脑醌、物料C、物料D、聚丙烯-graft-马来酸酐相容剂的质量比为40-50:40-50:2-3:1-2:1-1.2:1-1.2:0.5-0.8。
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