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龙图腾网恭喜山西医科大学第二医院申请的专利一种白色念珠菌和金黄色葡萄球菌共培养的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115747069B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-04发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211508348.2，技术领域涉及：C12N1/04；该发明授权一种白色念珠菌和金黄色葡萄球菌共培养的方法是由杨静;冯文莉;马彦;奚志琴;王艳;吴媛;刘侠设计研发完成，并于2022-11-29向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种白色念珠菌和金黄色葡萄球菌共培养的方法在说明书摘要公布了：本发明属于微生物培养技术领域，为了解决目前采用96孔细胞培养板进行金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的共培养，不利于观察白色念珠菌和金葡菌的粘附情况的问题，提供了一种白色念珠菌和金黄色葡萄球菌共培养的方法。50%FBS条件下，在载玻片上共培养白色念珠菌和金黄色葡萄球菌，培养过程中低速旋转载玻片。为今后观察期混合感染及相关研究提供实验基础。更清晰地观察二者粘附的新的实验方法。本文提出的方案可作为研究念珠菌与其他各种细菌相互作用的起点。

本发明授权一种白色念珠菌和金黄色葡萄球菌共培养的方法在权利要求书中公布了：1.一种白色念珠菌和金黄色葡萄球菌共培养的方法，其特征在于：50%FBS条件下，在载玻片上共培养白色念珠菌和金黄色葡萄球菌，培养过程中低速旋转载玻片；具体培养方法为：（1）制备对数生长期金黄色葡萄球菌：TSB培养基中过夜培养金黄色葡萄球菌：在24mlTSB液体培养基中加入50µl过夜培养的金黄色葡萄球菌，调整菌悬液浓度为OD600=0.02；37℃水浴箱孵育3.5小时，使金黄色葡萄球菌达到对数生长期，OD600=1.0；吸取24ml对数生长的菌悬液4500rpm、4℃离心25分钟；吸去上清，留下0.8-1.2ml重悬菌落；将重悬后的菌悬液移入到1.5mlEppendorf管中，14.5Krpm旋转30秒；用1mlHank's平衡盐溶液Ca2+Mg2+HBSS++清洗≥2遍；用1mlHBSS++重悬菌落；置于冰上备用；（2）制备细胞增殖示踪荧光探针CFDASE标记的金黄色葡萄球菌：取1ml金黄色葡萄球菌菌悬液，用HBSS++洗两遍；每毫升菌悬液加入1µl5mMCFDASE，终浓度为5µMml；暗视野：37℃水浴箱中孵育15min，用HBSS++清洗4遍；1mlHBSS++溶液中重悬细胞；室温放置30min；（3）白色念珠菌和金黄色葡萄球菌共培养：YPD液体培养基过夜培养白色念珠菌，吸取1ml菌悬液，使用HBSS++清洗两遍；用1mlHBSS++重悬细胞；吸取100µl的细胞混悬液到900ulHBSS++溶液中，稀释细胞；将300µl稀释后的细胞混悬液轻滴至玻璃载玻片上，37℃培养；倾斜载玻片，使用1mlHBSS++轻柔地冲洗载玻片，使未粘附的细胞洗掉；吸取200µl50%FBS在载玻片上，室温孵育30min；载玻片上加入300µl步骤（2）所标记好的金黄色葡萄球菌混悬液；轻柔放置到水平旋转仪上37℃培养1小时，荧光显微镜下观察粘附情况。

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