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龙图腾网恭喜中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所申请的专利一种尿液中多种烟草暴露标志物的检测方法和检测试剂盒获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119355177B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-08发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411918317.3，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种尿液中多种烟草暴露标志物的检测方法和检测试剂盒是由丁昌明;施小明;陆一夫;吕跃斌;朱英;赵峰;杨永杰;邱天;尹晋;曲英莉;张海婧;于钏钏;孙琦;鲍珊;宋皓璨设计研发完成，并于2024-12-25向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种尿液中多种烟草暴露标志物的检测方法和检测试剂盒在说明书摘要公布了：本发明提供了一种尿液中多种烟草暴露标志物的检测方法和检测试剂盒，属于化学检测技术领域。本发明提供的检测方法将尿液进行酶解后采用固体介质液液萃取柱萃取，得到待测液，再将待测液进行液相色谱‑高分辨率质谱检测，能够降低成本，同时检测灵敏度、精密度和准确度高，线性范围宽，能够同时准确检测14种烟草暴露标志物。

本发明授权一种尿液中多种烟草暴露标志物的检测方法和检测试剂盒在权利要求书中公布了：1.一种尿液中多种烟草暴露标志物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将尿液与缓冲溶液和酶混合，进行酶解，得到酶解液；（2）将所述步骤（1）得到的酶解液与碱液和混合内标溶液混合，得到混合液；（3）将所述步骤（2）得到的混合液采用固体介质液液萃取柱萃取，洗脱剂洗脱得到洗脱液，将所述洗脱液进行氮吹，再加入水复溶，得到待测液；（4）将所述步骤（3）得到的待测液进行液相色谱-高分辨率质谱检测，得到尿液中烟草暴露标志物的含量；所述步骤（1）中的酶为β-葡萄糖醛酸酶芳基硫酸酯酶；所述尿液、缓冲溶液和酶混合后酶的浓度为500~3000U0.45mL；所述步骤（1）中的缓冲溶液包括醋酸-醋酸铵缓冲溶液或甲酸-甲酸铵缓冲溶液；所述缓冲溶液的pH值为5~6；所述步骤（1）中尿液和缓冲溶液的体积比为（2~2.5）：1；所述步骤（2）中碱液的浓度为10~20molL；所述酶解液和碱液的体积比为（5~7）：1；所述步骤（3）中混合液的体积和固体介质液液萃取柱的质量比为400μL：（350~1000）mg；所述步骤（3）中的洗脱剂为二氯甲烷或异丙醇-二氯甲烷混合溶液；所述异丙醇-二氯甲烷混合溶液中异丙醇和二氯甲烷的体积比为：（1~10）：（90~99）；所述步骤（4）中液相色谱-高分辨率质谱检测时的液相色谱条件为：流动相A为体积浓度0.05~0.2%的氨水，流动相B为甲醇，流速为200~400μLmin，采用梯度洗脱，梯度洗脱条件为：0~5.17min10~20%B、5.17~12min30~50%B、12~13min40~100%B、13~14min100%B、14~15min10~20%B，色谱柱为Gemini®3µmNX-C18110A，色谱柱的长度为120~160mm，色谱柱的内径为1~3mm，填料粒径为1.5~2.0μm；所述步骤（4）中液相色谱-高分辨率质谱检测时的质谱条件为：喷雾电压为3~4kV，毛细管温度为300~400℃，分辨率为10000~75000，鞘气为40~50arb，辅助气为10~20arb，辅助气温度为300~400℃，分段扫描；所述多种烟草暴露标志物包括烟碱、可替宁、反式-3-羟基可替宁、降烟碱、降可替宁、烟碱氮氧化物、可替宁氮氧化物、假木贼碱、新烟碱、4-（甲基硝基胺）-1-（3-吡啶基）-1-丁醇、4-（甲基亚硝胺）-1-（3-吡啶基）-1-丁酮、N’-硝基降烟碱、N-亚硝基新烟碱和N-亚硝基假木贼碱。

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