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恭喜南京艾诺迪生物技术有限公司黄治中获国家专利权

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龙图腾网恭喜南京艾诺迪生物技术有限公司申请的专利一种重组抑制素B抗原及其制备方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119060158B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411184723.1,技术领域涉及:C07K14/495;该发明授权一种重组抑制素B抗原及其制备方法与应用是由黄治中;杨廷亚;陈星宇;曹凌波设计研发完成,并于2024-08-27向国家知识产权局提交的专利申请。

一种重组抑制素B抗原及其制备方法与应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种重组抑制素B抗原及其制备方法与应用,包括α和β两个亚单位抗原,α亚单位的编码序列和β亚单位的编码序列分别融合TrxA标签,实现可溶表达;表达一段时间后启动编码SUMO蛋白酶的质粒表达,进行细胞内酶切,去除TrxA标签,得到仅含His标签的α和β两个亚单元抗原。本发明重组抑制素B抗原的α和β两个亚单位抗原可溶表达,并不含TrxA标签,可降低免疫时非靶标抗原肽的免疫原性,可实现高效免疫。细胞内酶切工艺简单,方便抗原纯化。

本发明授权一种重组抑制素B抗原及其制备方法与应用在权利要求书中公布了:1.一种重组抑制素B抗原的制备方法,其特征在于:所述重组抑制素B抗原包括α和β两个亚单位抗原,α亚单位的编码序列和β亚单位的编码序列分别融合TrxA标签,实现可溶表达;表达一段时间后启动编码SUMO蛋白酶的质粒表达,进行细胞内酶切,去除TrxA标签,得到仅含His标签的α和β两个亚单元抗原;抗原α亚单元抗原的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,β亚单元抗原的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示,TrxA标签的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示,SUMO蛋白酶的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示;所述制备方法包括以下步骤:S1、抑制素B的α和β亚单元表达质粒构建,具体步骤如下:S1-1、将TrxA的C端6xHis标签删除;S1-2、将SUMO蛋白酶的识别序列插入在肠激酶识别位点和多克隆位点之间,其中SUMO蛋白酶的识别序列的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示;S1-3、将抑制素B的α亚单元和β亚单元分别插入载体多克隆位点;S2、SUMO蛋白酶表达质粒构建,具体步骤如下:S2-1、将pBAD24载体中抗性标签氨苄青霉素替换为氯霉素;S2-2、将SUMO蛋白酶编码序列插入步骤1所述载体;S3、抑制素B的α和β亚单元蛋白表达纯化,具体步骤如下:S3-1、将α和β亚单元质粒分别与SUMO蛋白酶表达质粒共转染BL21(DE3)感受态细胞;S3-2、挑取单克隆接种,待培养物OD值为0.6-0.8时,加入0.1-1mMIPTG,16℃诱导α或β亚单元蛋白表达,12-16h后,再加入0.5%-0.001%阿拉伯糖诱导SUMO蛋白酶表达;S3-3、离心收集菌体,用PBS重悬,细胞超声破碎后再次离心收集上清,沉淀丢弃;S3-4、上清经过Ni柱亲和纯化,用含不同梯度咪唑的PBS洗脱,收集组分得到目的蛋白。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人南京艾诺迪生物技术有限公司,其通讯地址为:211800 江苏省南京市江北新区新锦湖路3-1号中丹园A座21楼;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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