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恭喜华中科技大学同济医学院附属同济医院周建华获国家专利权

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龙图腾网恭喜华中科技大学同济医学院附属同济医院申请的专利一种ttc21b基因缺失动物模型的构建方法及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118813623B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410962747.9,技术领域涉及:C12N15/113;该发明授权一种ttc21b基因缺失动物模型的构建方法及其应用是由周建华;杨媛;邓林霞;尹晓玲;周兰琪;熊博;张瑜设计研发完成,并于2024-07-18向国家知识产权局提交的专利申请。

一种ttc21b基因缺失动物模型的构建方法及其应用在说明书摘要公布了:本申请涉及生物技术领域,尤其涉及一种ttc21b基因缺失动物模型的构建方法及其应用;该构建方法包括:设计靶向ttc21b基因的sgRNA序列;使用sgRNA序列对模板PCR扩增,得到转录模板gDNA,分别对转录模板gDNA和pT3‑Cas9质粒体外转录并混合,得到sgRNA和Cas9mRNA混合物;向斑马鱼单细胞期受精卵中注射该混合物,得到含突变基因的斑马鱼;饲养含突变基因的斑马鱼后筛选得到ttc21b基因缺失的斑马鱼模型;本申请通过CRISPRCas9基因编辑技术得到ttc21b基因缺失的斑马鱼模型,可以为探究肾单位肾痨及其相关纤毛病的发病机制研究和治疗药物的筛选提供一种理想的动物模型。

本发明授权一种ttc21b基因缺失动物模型的构建方法及其应用在权利要求书中公布了:1.一种ttc21b基因缺失动物模型的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括:S1.设计靶向ttc21b基因的sgRNA序列;其中,所述sgRNA序列靶向ttc21b基因的第6号外显子靶位点;所述第6号外显子靶位点的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示;S2.使用作为正向引物的所述sgRNA序列和通用反向引物对模板进行PCR扩增,以得到sgRNA的转录模板gDNA;其中,所述模板为pT7-gRNA质粒;其中,所述通用反向引物的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;S3.分别对所述转录模板gDNA和线性化的pT3-Cas9质粒进行体外转录,并混合,得到具有sgRNA和Cas9mRNA的混合物;S4.向动物模型单细胞期受精卵中注射具有sgRNA和Cas9mRNA的所述混合物,并对所述动物模型中ttc21b基因的靶位点进行剪切,以使ttc21b基因产生DNA双链断裂,随后进行DNA修复,得到含突变基因的动物模型;S5.饲养并筛选所述含突变基因的动物模型,得到ttc21b基因缺失的动物模型;所述动物模型为斑马鱼动物模型。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人华中科技大学同济医学院附属同济医院,其通讯地址为:430030 湖北省武汉市解放大道1095号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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