恭喜海南大学张冬冬获国家专利权
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龙图腾网恭喜海南大学申请的专利一种鱼组织单细胞悬液及其制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115418342B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211236230.9,技术领域涉及:C12N5/071;该发明授权一种鱼组织单细胞悬液及其制备方法是由张冬冬;周永灿;王培博;许莹萱;王世锋;郭伟良;李建龙;蔡岩设计研发完成,并于2022-10-10向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种鱼组织单细胞悬液及其制备方法在说明书摘要公布了:本公开提供了一种鱼组织单细胞悬液及其制备方法,所述方法包括:将鱼体的目的组织预处理为组织碎片,并置于装有缓冲液的离心管内;将离心管离心,除去上清液,加入BSA‑DPBS溶液,吹打以重悬组织碎片;除去离心管内上层清液,加入酶解离试剂消化组织碎片;除去离心管内上层清液,加入BSA‑DPBS溶液,吹打以重悬消化后的组织碎片,得到细胞混合物;将细胞混合物通过细胞过滤筛过滤,收集滤液;滤液中加入DNaseI,室温孵育;孵育后的混合物离心,除去上清液,重悬于DPBS中,吹打分散细胞,得到目的组织单细胞悬液。通过本发明的制备方法,能够实现快速、高效获得鱼类组织单细胞悬液,并保证解离的细胞活力,单细胞悬液质量满足单细胞测序要求。
本发明授权一种鱼组织单细胞悬液及其制备方法在权利要求书中公布了:1.一种鱼组织单细胞悬液的制备方法,其特征在于,所述方法包括:将鱼体的目的组织预处理为组织碎片,并置于装有缓冲液的离心管内;将离心管离心,除去上清液,加入BSA-DPBS溶液,吹打以重悬组织碎片;所述吹打为使用宽口玻璃管吹打或宽口低吸附枪头吹打;除去离心管内上层清液,加入酶解离试剂消化组织碎片;所述酶解离试剂包括体积分数为90-95%胶原酶和分散酶溶液,以及5%-10%的FBS;除去离心管内上层清液,加入BSA-DPBS溶液,吹打以重悬消化后的组织碎片,得到细胞混合物;将细胞混合物通过细胞过滤筛过滤,收集滤液;滤液中加入DNaseI,室温孵育;孵育后的混合物离心,除去上清液,重悬于DPBS中,吹打分散细胞,得到目的组织单细胞悬液。
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