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龙图腾网恭喜上海诗丹德标准技术服务有限公司申请的专利马兜铃酸D的对照品的制备方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116554139B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310434003.5，技术领域涉及：C07D317/70；该发明授权马兜铃酸D的对照品的制备方法是由冯光辉;赵坤;辛振强;舒亚平;李雪松;房强强;钱勇设计研发完成，并于2023-04-21向国家知识产权局提交的专利申请。

本马兜铃酸D的对照品的制备方法在说明书摘要公布了：本发明提供马兜铃酸D的对照品的制备方法，包括酸碱前处理工序、特定的聚酰胺柱层析工序以及正相和反相色谱柱提纯工序等，通过特定的前处理，有效提升了提取分离效率，能够高通量的获得HPLC纯度高的目标物对照品。另外，本发明获得的马兜铃酸D的固体对照品的制备方法，工业生产适用性非常好。

本发明授权马兜铃酸D的对照品的制备方法在权利要求书中公布了：1.一种马兜铃酸D的对照品的制备方法，其特征在于，依次包括以下步骤：酸碱处理工序，将天仙藤药材总提取物，以3~7倍重量的pH值8~9的碱化的水溶液混悬，静置0.5~1.5小时后，再以0.8~4倍体积的有机溶剂萃取，回收水相，加入酸性水溶液，调节pH至3~4，用0.8~4倍体积的体积有机溶剂萃取，回收有机相，浓缩得到天仙藤总提取物II，该工序中，酸化水溶液为8wt%~10wt%的盐酸，碱性溶液为碳酸氢钠溶液，用于萃取的有机溶剂为选自卤代烃溶剂、酯类溶剂中的一种，卤代烃溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1，1-二氯乙烷、1，2-二氯乙烷、1，1，1-三氯乙烷、1，1，2-三氯乙烷、1，1，1，2-四氯乙烷、1，1，2，2-四氯乙烷、五氯乙烷、1，1-二氯乙烯、1，2-二氯乙烯、三氯乙烯及四氯乙烯中的一种或多种的组合，酯类溶剂选自乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸苯酯、苯甲酸甲酯、乙酸丁酯、丙烯酸辛酯中的一种或多种的组合；聚酰胺纯化工序，将天仙藤总提取物II上样于100~200目聚酰胺柱层析，以乙酸乙酯：甲醇=20:1~10:1洗脱液逐渐增加极性进行洗脱，该甲醇中含有9体积%~10体积%的甲酸以及9体积%~10体积%的水，根据TLC或者HPLC检测收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥，天仙藤粗提物I；反相色谱纯化工序：反相色谱纯化工序先进行中低压反相色谱纯化工序，再进行高压反相色谱纯化工序，其中中低压反相色谱纯化工序中，将天仙藤粗提物I上样至反相色谱柱，用乙腈水溶液或甲醇水溶液的混合洗脱剂，以0.5～1Mpa压力进行洗脱，其中，乙腈或甲醇：水的比例以体积比计为0.4~0.6:1，根据TLC或者HPLC检测收集洗脱液，将洗脱液在50℃以下的温度减压浓缩，去除其中的乙腈或甲醇，得到含有马兜铃酸D的粗品II-1；高压反相色谱纯化工序中将马兜铃酸D的粗品II-1上样至反相色谱柱，用含有0.1%~0.3%乙酸的乙腈水溶液或甲醇水溶液的混合洗脱剂，以1～15Mpa压力进行洗脱，其中，乙腈或甲醇：水的比例以体积比计为0.4~0.67:1，根据TLC或者HPLC检测收集洗脱液，得到马兜铃酸D的粗品II溶液；溶剂处理工序，将反相色谱纯化工序中所得到马兜铃酸D的粗品II溶液在50℃以下的温度浓缩，得到析出物，淋洗，干燥之后获得马兜铃酸D的对照品。

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