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龙图腾网恭喜华南农业大学;深圳市通量检测科技有限公司申请的专利一种苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115753707B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-06发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211392898.2，技术领域涉及：G01N21/64；该发明授权一种苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法是由罗林;林诗淇;贾宝珠;徐振林;周凯;孙远明;王幸幸;周全军设计研发完成，并于2022-11-08向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法，其包括以下步骤：S1.蓝色荧光碳点的合成；S2.微孔板的包被；S3.标准曲线的建立；S4.样品中苯佐卡因浓度的测定。本发明基于两个荧光材料发射峰荧光强度的比值变化进行免疫分析，由于两个荧光材料受到的外界的干扰是一样的，两者的荧光强度比值一定程度上抵消了温度、极性、荧光团浓度等外界因素的干扰，具有自带内标效应，因此具有更高精密度、信噪比及灵敏度。该方法对苯佐卡因检出限下达1fgmL，显著低于现有检测方法，可用于苯佐卡因快速检测，应用前景广阔。

本发明授权一种苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法在权利要求书中公布了：1.一种苯佐卡因的比率荧光免疫检测方法，其特征在于，其包括以下步骤：S1.蓝色荧光碳点的合成：将柠檬酸二铵和尿素加入到烧杯中并加入超纯水溶解，溶解后转移至高压反应釜中加热反应；反应完成后待冷却至室温取出，过滤后将滤液用超纯水透析，得到蓝色荧光碳点水溶液；S2.微孔板的包被：将苯佐卡因包被原加入微孔板中，在冰箱静置一段时间，随后洗去包被液；将微孔板拍干，加入封闭液，温育一段时间后，将微孔板拍干，烘干，备用；S3.标准曲线的建立：将不同浓度的苯佐卡因标准溶液与抗体同时加入步骤S2得到的微孔板中，温育一定时间后，洗板，加入碱性磷酸酶标记的羊抗鼠二抗，温育一段时间后洗板，加入L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐溶液温育，随后加入步骤S1制备的蓝色荧光碳点水溶液和多巴胺溶液，温育；在350nm激发下，记录380～600nm范围内的荧光发射光谱，随后在430nm激发下，记录460~700nm范围内的荧光发射光谱，计算荧光强度比值F460F510，以苯佐卡因浓度为横坐标，F460F510为纵坐标绘制标准曲线；S4.样品中苯佐卡因浓度的测定：将等体积处理好的样品替代苯佐卡因标准品溶液，按照步骤S3的步骤操作，将测到的F460F510代入所述步骤S3得到的标准曲线，以得到样品中苯佐卡因浓度；所述步骤S3中抗体的浓度为1～5μgL-1，时间为30～40min；所述步骤S3中L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐浓度为0.1～1mM，时间为30～40min；所述步骤S3中多巴胺浓度为5～10mM；所述步骤S3中，加入步骤S1制备的蓝色荧光碳点水溶液和多巴胺溶液，温育30～40min。

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