恭喜江西省药品检验检测研究院吴毅获国家专利权
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龙图腾网恭喜江西省药品检验检测研究院申请的专利一种半夏与水半夏的UPLC-Q/TOF-MS鉴别方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119534711B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-09发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510088177.X,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种半夏与水半夏的UPLC-Q/TOF-MS鉴别方法是由吴毅;万林春;付辉政;张鹏;王峰;肖小武;吴秋云设计研发完成,并于2025-01-21向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种半夏与水半夏的UPLC-Q/TOF-MS鉴别方法在说明书摘要公布了:本发明涉及中药检测技术领域,具体涉及一种半夏与水半夏的UPLC‑QTOF‑MS鉴别方法。本发明基于超高效液相色谱‑四级杆飞行时间质谱采集的半夏、姜半夏、水半夏和姜水半夏成分信息,结合多元统计学方法对特征物质进行筛选,对半夏和水半夏进行OPLS‑DA分析,找到二者差异性化合物,结合箱线图分析、热图分析及相关性分析等多种分析方法,确定半夏和水半夏及其炮制品鉴别的关键性化合物5个,然后通过测定这5个关键性化合物的相对含量,利用OPLS‑DA分析建立半夏、水半夏鉴别模型,可以实现半夏及其炮制品中掺杂水半夏的检测。
本发明授权一种半夏与水半夏的UPLC-Q/TOF-MS鉴别方法在权利要求书中公布了:1.一种半夏与水半夏的UPLC-QTOF-MS鉴别方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、取半夏、姜半夏、水半夏和姜水半夏分别制备供试品溶液;取α-亚麻酸、松香酸、橙皮苷、苍术素、精氨酸、腺苷、鸟苷、尿苷、葫芦巴碱、邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二辛酯制备混合对照品溶液;S2、将S1制备的半夏、姜半夏、水半夏和姜水半夏供试品溶液,分别采用超高效液相色谱分离和高分辨质谱检测,采用正离子MSE扫描模式,获得正离子模式下半夏、姜半夏、水半夏和姜水半夏质谱数据,基于质谱数据找出半夏和水半夏的差异性成分;S3、将S1制备的供试品溶液和混合对照品溶液采用超高效液相色谱分离和高分辨质谱检测,采用正离子MSE扫描模式,获得正离子模式下的质谱基峰色谱图离子流图,采集的UPLC-QTOF-MS数据利用UNIFIPortal软件提取化合物信息,根据化合物的保留时间、准确分子离子峰和二级质谱信息,对所检测的供试品溶液成分进行分析及鉴定;S4、利用ProgenesisQI软件结合多元统计学方法,对S2找出的差异性成分进行鉴定,确定半夏与水半夏的差异性成分为精氨酸、葫芦巴碱、尿苷、反式对羟基桂皮酸、苯丙氨酸、缬色脯甘脯肽、半夏胺B、半夏胺A、亚油酸乙醇酰胺、亚油酸-1-单甘油酯、亚油酸和α-棕榈精;S5、对S4确定的差异性成分通过箱线图分析、热图分析和相关性分析比较,确定半夏、姜半夏、水半夏和姜水半夏鉴别的关键性化合物,所述关键性化合物为半夏胺A、半夏胺B、精氨酸、缬色脯甘脯肽和葫芦巴碱,利用S3检测的上述关键性化合物的半定量数据采用SIMCA-P14.1软件建立半夏和水半夏的OPLS-DA分析模型;S6、取待鉴定的样品,按照S1的方法制备供试品溶液,采用超高效液相色谱分离和高分辨质谱检测,获得正离子模式下的质谱基峰色谱图离子流图,采集S5中关键性化合物的质谱信息;S7、将S6中采集的关键性化合物的质谱信息导入S5中的OPLS-DA分析模型进行鉴定;S2中,找出半夏和水半夏的差异性成分的具体方法包括:S21、将正离子模式下采集的半夏、水半夏、姜半夏和姜水半夏的质谱数据分别导入ProgenesisQI软件,对采集得到的谱图进行峰标准化、峰提取、峰对齐、峰匹配校正,得到包含化合物保留时间和质荷比信息;S22、将所有的化合物数据导入Ezinfo3.0软件得到.txt文件;S23、将得到的.txt文件导入SIMCA-P14.1软件进行多元统计学分析,包括主成分分析法和正交偏最小二乘法-判别分析法对半夏、姜半夏,水半夏、姜水半夏样品进行区分,以VIP>1且P<0.05作为差异成分的筛选条件筛选出存在显著性差异的化合物;S2和S3中超高效液相色谱分离和高分辨质谱检测采用的色谱条件为:液相色谱柱:WatersACQUITYUPLCBEHC18,2.1mm×100mm×1.7μm;流动相:乙腈为流动相A,0.1%甲酸水溶液为流动相B,采用的梯度洗脱程序为:0~1min,5%A;1~8min,5%~24%A;8~16min,24%~48%A;16~25min,48%~78%A;25~30min,78%~100%A;柱温:40℃;流速:0.3mLmin;进样量:1μL;S2和S3中超高效液相色谱分离和高分辨质谱检测采用的质谱条件为:采用正离子模式进行MSE扫描;锥孔电压:40V;源偏移:80V;离子源温度:100℃;脱溶剂气温度:500℃;锥孔气体积流量:50Lh;脱溶剂气体积流量:800Lh;采样锥电压:40V;低碰撞电压:6V;高碰撞电压:40~60V。
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