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龙图腾网恭喜南京林业大学申请的专利一种培育转抗旱基因杨树的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115491387B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-16发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211178390.2，技术领域涉及：C12N15/84；该发明授权一种培育转抗旱基因杨树的方法是由孙甜甜;张往祥;张一;范俊俊;闫新阳;衡启蒙设计研发完成，并于2022-09-26向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种培育转抗旱基因杨树的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种培育转抗旱基因杨树的方法，属于植物基因工程技术领域。本发明以优良杨树品种为植物材料，通过目的基因克隆、载体构建、农杆菌侵染液的制备、杨树叶片遗传转化，获得转基因抗旱杨树。其中，农杆菌侵染液中含有根据树种的营养需求改进的AAM重悬培养基，杨树叶片遗传转化阶段培养基中含有TDZ和Carb，改进的AAM重悬培养基可充分提高菌液活性和转化效率，加速芽的生长并提高出芽率和阳性率，与Carb的专适搭配可有效保证阳性率并抑制农杆菌的过量生长，TDZ加速叶片细胞分化，不经愈伤组织可直接长出芽点，缩短转化周期，实现高效转化，阳性率可高达62.5％，可加速耐旱型杨树的育种进程。

本发明授权一种培育转抗旱基因杨树的方法在权利要求书中公布了：1.一种培育转抗旱基因杨树的方法，其特征在于，包括以下步骤：1构建杨树耐干旱胁迫基因的植物表达载体；2将所构建的杨树耐干旱胁迫基因的植物表达载体转入农杆菌；3将含有杨树耐干旱胁迫基因的重组农杆菌用改进的AAM重悬培养基进行重悬，至OD600为0.6-0.9时，加入200μmolLAS制成农杆菌侵染液；所述改进的AAM重悬培养基的配方为：蔗糖68500mgL+葡萄糖36000mgL+KCl3000mgL+谷氨酰胺900mgL+酸水解酪蛋白500mgL+MgSO4250mgL+KH2PO4185mgL+精氨酸176mgL+CaCl2·2H2O150mgL+肌醇100mgL+FeNaEDTA36.7mgL+VB110mgL+MnSO4·H2O7.58mgL+甘氨酸7.5mgL+H3BO33mgL+ZnSO4·7H2O2megL+烟酸1mgL+VB61mggL+KI0.8mggL+Na2MoO4·2H2O0.25mgL+CoCl2·6H2O0.025mgL+CuSO4·5H2O0.025mgL；4选择生长状态良好的杨树组培苗，取顶端幼嫩的叶片为植物材料，去除主叶脉和叶尖，在叶脉处进行创伤处理，置于MS分化培养基中预培养24h；将预培养的叶片取出，置于侵染液中侵染，结束后将叶片取出，用滤纸吸干，放回MS分化培养基中，在黑暗条件下倒置3d；5将MS分化培养基中的叶片取出，用无菌水冲洗后，再用含有Carb的水冲洗，滤纸吸干后转入MS选择培养基中培养7d；6将MS选择培养基中的叶片转入MS筛选培养基中进行培养，每10d更换一次筛选培养基，期间不经愈伤组织直接长出芽点，待第3次更换培养基时，将其转至装有转化植物生根培养基的无菌组培瓶中，获得转抗旱基因杨树苗；步骤1中，使用的杨树耐干旱胁迫基因为Potri.008G065600；步骤2中，使用的农杆菌为GV3101农杆菌；步骤4中，所述MS分化培养基的配方为：MS+NAA0.05mgL+6-BA0.5mgL+TDZ0.01mgL+蔗糖30gL+植物凝胶4.2gL+AS200μmolL，pH＝5.8-6.0；步骤5中，将MS分化培养基中的叶片取出，用无菌水冲洗5-6次后，再用含有400mgLCarb的水冲洗。

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