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龙图腾网恭喜广西科学院申请的专利一种生产乙偶姻基因工程菌株及其构建方法与应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116024150B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211601379.2，技术领域涉及：C12N1/21；该发明授权一种生产乙偶姻基因工程菌株及其构建方法与应用是由谢能中;陈先锐;刁梦雪;李检秀;蒙丽钧设计研发完成，并于2022-12-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种生产乙偶姻基因工程菌株及其构建方法与应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种生产乙偶姻基因工程菌株及其构建方法与应用，先筛选和鉴定影响大肠杆菌乙偶姻胁迫抗性的功能基因，利用基因组遗传改造手段引入抗逆因子以提高菌株对产物的耐受性，再通过优化重组质粒拷贝数提高乙偶姻合成途径关键基因的表达水平，获得高合成能力和高胁迫抗性的工程菌株；然后采用廉价原料发酵合成乙偶姻，并在适宜条件下高效转化生成四甲基吡嗪；最后使用脱色纯化后的发酵液转化得到了较高纯度的四甲基吡嗪。本发明工艺方法绿色环保，可生成高值化学品（R）‑乙偶姻和四甲基吡嗪，为将来规模化工业生产奠定了重要的理论和技术基础。

本发明授权一种生产乙偶姻基因工程菌株及其构建方法与应用在权利要求书中公布了：1.一种生产乙偶姻基因工程菌株,其特征在于，包括：（1）利用CRISPRCas9基因编辑技术，在大肠杆菌GXASR10基因组脂肪酸合成基因Yibt位点整合单拷贝的蛋白质延伸因子EF-Ts基因tsf，获得的工程菌株ΔGXASR10；所述基因Yibt的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示，所述基因tsf的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示；（2）在大肠杆菌GXASR10、ΔGXASR10分别转化表达重组质粒pTrc99a-budB-budA-noxE，获得的工程菌株GXASR10pTrc99a-budB-budA-noxE、ΔGXASR10pTrc99a-budB-budA-noxE；（3）利用无缝克隆技术，将质粒pRSFDuet上的RSF复制子替换重组质粒pTrc99a-budB-budA-noxE的复制子ori得到新的重组质粒，然后将该新的重组质粒在大肠杆菌GXASR10、ΔGXASR10分别转化表达，获得的工程菌株R-GXASR10pTrc99a-budB-budA-noxE、R-ΔGXASR10pTrc99a-budB-budA-noxE；所述RSF复制子是以质粒pRSFDuet为模板，先使用不含同源序列的引物RSF-FR进行PCR扩增质粒pRSFDuet上的RSF复制子连带卡那霉素抗性基因，然后再以RSF连带卡那霉素抗性基因为模板，使用含同源序列的引物RSF-F1R1进行PCR扩增获得的。

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