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龙图腾网恭喜重庆医科大学申请的专利一种基于PdIrBP介孔纳米球与科琴黑的循环肿瘤细胞生物传感器获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN113008971B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-03发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：201911321158.8，技术领域涉及：G01N27/48；该发明授权一种基于PdIrBP介孔纳米球与科琴黑的循环肿瘤细胞生物传感器是由冯文莉;谢国明;彭杨设计研发完成，并于2019-12-19向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于PdIrBP介孔纳米球与科琴黑的循环肿瘤细胞生物传感器在说明书摘要公布了：循环肿瘤细胞的检测和回收对监测转移和治疗效果具有重要的临床意义。在这项工作中，我们开发了一种基于纳米材料的集成电化学传感模型，以实现对循环肿瘤细胞的高灵敏检测和无损收集。首次将科琴黑与金纳米颗粒结合在一起，并用于修饰金电极的表面，从而提高了电导率并增加了电极的比表面积。PdIrBP介孔纳米球和抗体结合在一起形成信号探针，用作探测标签以放大电流信号。此外，将甘氨酸盐酸用作抗体洗脱液，可从电极释放并收集捕获的循环肿瘤细胞，以用于进一步的临床研究。在10mL到1×106mL范围内获得的电化学信号和靶细胞浓度之间有良好的线性关系，检出限低至2mL。因此，这种新型的细胞传感器模型具有潜在的临床应用价值，可用于癌症患者的早期诊断和预后监测。

本发明授权一种基于PdIrBP介孔纳米球与科琴黑的循环肿瘤细胞生物传感器在权利要求书中公布了：1.一种基于PdIrBP介孔纳米球与科琴黑的循环肿瘤细胞生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1科琴黑的准备借助于超声搅拌将2.0mg的科琴黑分散在4.0mL的0.5wt.％的壳聚糖溶液中以获得均匀的悬浮液；2金纳米颗粒的制备将100mL的0.01％氯金酸水溶液煮沸10-15分钟，然后在剧烈搅拌和连续加热的情况下逐滴加入1mL的2.0wt.％柠檬酸钠溶液，然后将上述混合溶液连续搅拌直至颜色从黄色变为深粉红色，加热停止；待冷却至室温后，以11000rmin的转速离心10分钟，用去离子水洗涤收集金纳米颗粒，并在4℃下保存；3PdIrBP介孔纳米球的合成将30mg双十八烷基二甲基氯化铵添加到10.0mL去离子水中，并搅拌以获得均匀的溶液；随后，将1.0mL的0.337molL氟化铵，1.0mL的0.101molL硼酸添加到之前的溶液中，然后添加金属前体0.8mL的10mmolL氯钯酸和0.8mL的10mmolL氯铱酸；温育5分钟后，注入0.8mL的氨水10wt.％以调节溶液的pH；当混合溶液的颜色从棕黄色变为无色后，将1.0mL的0.034molL次磷酸二氢钠混合到上述溶液中，并在95℃下磁力搅拌20分钟；最后，注入1.0mL新鲜制备的0.1molL二甲胺硼烷以引发还原反应，溶液的颜色逐渐演变为深棕色；在95℃下反应30分钟后，通过以8000rmin离心5分钟收集产物，并用乙醇和去离子水洗涤几次；4信号探针的制备将0.5mg聚乙二醇添加到1.0mL的PdIrBP介孔纳米球1.0mgmL中，将混合物在室温下搅拌孵育3小时，然后用去离子水离心洗涤3次，最后将沉淀物分散在500μL去离子水中以备将来使用；抗体和经聚乙二醇修饰的PdIrBP纳米球通过使用1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺作为偶联剂连接；将50μL上述制备的修饰过的PdIrBP介孔纳米球在室温下添加至450μL的10mmolLPBS中，并充分搅拌；随后加入1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亚胺5μL，25mM水溶液和N-羟基琥珀酰亚胺5μL，50mM水溶液，20分钟后，将纳米材料用去离子水洗涤两次，然后重新分散在50μL的PBS中；随后，将50μL抗体20mgmL添加到纳米球悬液中，在室温下孵育1小时后，将反应溶液储存在4℃的冰箱中以备将来使用；5生物传感器的构建将金电极直径3mm用0.3μm和0.05μm的氧化铝抛光至镜面状，随后分别在双蒸水，乙醇和双蒸水中交替超声处理10分钟；在室温下干燥后，将电极在新鲜制备的食人鱼液98％硫酸：30％过氧化氢，体积比为3：1中活化5分钟，并用超纯水彻底冲洗，在空气中干燥；将10μL步骤1准备好的科琴黑溶液加到电极上，并在37℃下进行干燥，用同样的方法将步骤2富集的金纳米颗粒滴加在已修饰了科琴黑的电极上；再将10μL抗体混合物80μgmL滴加在修饰电极上，在37℃下加盖放置1h；用0.01molL的PBS缓冲液冲洗后，再加入10μL的0.3％BSA在37℃孵育1h，以封闭非特异性结合位点；所得的电极用PBS洗涤，并保存在4℃备用；6循环肿瘤细胞的检测及释放将10μL循环肿瘤细胞加到步骤5制备好的电极上，在37℃温育40分钟。然后将10μL步骤4合成的信号探针滴到电极上进行免疫反应，形成双抗夹心免疫复合物；用PBS洗净未结合在电极上的物质，检测出电极的DPV信号；在细胞检测完成后，将电极浸入1mL甘氨酸-盐酸洗脱液0.1molL中10s，然后快速加入几滴0.4molL的NaOH溶液以调节pH值；在500rmin下离心5分钟后，将所得沉淀物用PBS0.01molL洗涤2-3次获得循环肿瘤细胞。

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