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申请/专利权人:杭州保安康生物技术有限公司
申请日:2013-03-27
公开(公告)日:2013-06-19
公开(公告)号:CN103160455A
专利技术分类:.细菌;其培养基[2006.01]
专利摘要:本发明提出了一种凝结芽孢杆菌的芽孢制剂的制备方法,包括:a斜面菌体活化;(b)凝结芽孢杆菌的种子罐培养;(c)凝结芽孢杆菌的固体发酵;将步骤(b)中的培养基按1%~10%的重量比接入固体发酵培养基中,采用半封闭式发酵48~72h。本发明采用半封闭式固体发酵工艺,在发酵过程中物料处于半封闭状态,与少量空气接触,生长期可以充分利用残余氧气使凝结芽孢杆菌菌体大量繁殖,生长后期氧气大量减少,刺激芽孢快速形成,同时可以代谢较多的L-乳酸,解决发酵过程中产酸不足的情况,通过夺氧作用抑制杂菌的生长,解决固体发酵污染的情况。
专利权项:一种凝结芽孢杆菌的芽孢制剂的制备方法,包括:a斜面菌体活化将凝结芽孢杆菌(ACCC10229)接种至一级斜面培养基上,30℃~45℃培养20~32h;(b)凝结芽孢杆菌的种子罐培养将步骤(a)中的活化后的结芽孢杆菌单菌落接种于二级培养液中,装液量为50~100mL500mL,30℃~45℃、160~300rpmmin条件下培养20~32h;然后将培养后的种子液体积百分比0.5~10%,在培养基上30℃~45℃、160~300rpmmin条件下培养20~36h;(c)凝结芽孢杆菌的固体发酵将步骤(b)中的培养基按1%~10%的重量比接入固体发酵培养基中,培养基含水量控制在49%~58%,pH范围在6.0~7.0,曲房相对湿度保持在85%以上,料温控制在30℃~45℃,采用半封闭式发酵48~72h;或者(b’)将步骤(a)中的活化后的结芽孢杆菌单菌落接种于二级茄型培养瓶中,30℃~45℃培养36~48h;(c’)按10~15瓶二级茄型培养瓶培养基接入1.0t固体发酵培养基中,培养基含水量控制在49%~58%,pH范围在6.0~7.0,曲房相对湿度保持在85%以上,料温控制在30℃~45℃,采用半封闭式发酵48~72h。
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