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申请/专利权人：图尔库大学
申请日：2010-12-21
公开（公告）日：2016-03-16
公开（公告）号：CN102695795B
专利技术分类：..分离、制备或纯化DNA或RNA的方法（DNA或RNA的化学制备入C07H21/00；自微生物中或用酶制备非结构多核苷酸入C12P19/34）[2006.01]
专利摘要：本发明提供了一种诱变方法，其中在引物延伸反应中用至少一种诱变引物诱变核酸分子，并随后通过滚环扩增（RCA）进行扩增。所述方法包括下述步骤：通过链置换DNA聚合酶，仅导致突变链的选择性扩增。在多次引发的RCA中产生突变的质粒的多个拷贝，并转化得到的DNA进行使用。所述方法适用于突变单链和双链DNA。本发明也提供了用于诱变方法中的试剂盒。
专利权项：一种诱变核酸分子的方法，所述方法由下述步骤组成：a提供含有尿嘧啶的模板，所述模板包含在环状DNA载体中的靶核酸分子，b提供至少一种诱变引物，其含有要导入靶核酸分子中的突变，c使所述诱变引物与靶核酸分子退火，d进行一次引物延伸和连接反应，以形成双链的异源双链体，其中一条链是模板链，另一条链是新合成的突变链，e通过尿嘧啶‑DNA糖基化酶UDG处理，使模板链不适于滚环扩增RCA，f通过多次引发的滚环扩增来扩增所述突变链，和g将扩增的DNA转化至合适的宿主中。
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