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申请/专利权人：中国海洋大学

摘要：本发明提供了一种北方耐低温熊本牡蛎新品系的培育方法，选取熊本牡蛎和长牡蛎都属于巨蛎属，利用长牡蛎和熊本牡蛎不同耐温、耐盐品种之间杂交后再进行自交，再进行纯化，杂交、自交连续多代选育，最终得到耐低温熊本牡蛎新品系。实践证明，利用本发明得到的耐低温熊本牡蛎新品系在养殖中突出的优点是耐低温、成活率高、生长速度大大提高,与普通品种的熊本牡蛎相比，生长速度可提高30%以上，成活率提高了50%以上，耐低温提高了5‑6℃。利用本发明得到的熊本牡蛎新品系能够克服目前北方熊本牡蛎冬季死亡问题，保证了熊本牡蛎养殖产业可持续发展。

主权项：1.一种北方耐低温熊本牡蛎新品系的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：a、亲本采集：采集经分子标记确定熊本牡蛎和长牡蛎作为纯种亲本；b、同步促熟培育：对每个种做好标记，在室内进行性腺促熟培育，根据熊本牡蛎生物学特点，挑选壳高在5-7cm的2-3龄熊本牡蛎做亲贝，在室内培育池进行升温促熟培育，为使熊本牡蛎和长牡蛎性腺发育同步，熊本牡蛎要比长牡蛎提前40-60天入池培育，入池水温应在熊本牡蛎性腺发育的生物学最低温度15℃以上，亲贝稳定生长2-3天后，每天升温1℃，且保持在26-28℃温度下培育亲贝成熟待产；熊本牡蛎入池海水盐度先在盐度20-22ppt中培育12-15天后，再在25-26ppt的海水中培育15-18天，最后放入正常的30-32ppt的正常海水中培育至产卵、排精；长牡蛎根据熊本牡蛎升温促熟性腺发育情况后，入池进行促熟培育，以实现熊本牡蛎和长牡蛎的同步发育成熟；c、剖取精、卵及杂交培育：当熊本牡蛎和长牡蛎亲贝性腺同步发育成熟以后，通过解剖、镜检区分雌、雄贝，严格分离，获取熊本牡蛎成熟卵子和长牡蛎精子，进行两物种间杂交受精，得到两个亲本的杂交子代；d、子代培育：当获得了杂交子代以后，进行子代培育，按照牡蛎常规人工育苗方法进行培育管理，经过幼虫培育获得杂交稚贝，稚贝经过中间育成及养成获得杂交子一代F1；f、杂交F1耐低温淘汰选择：以d步骤培育的杂交新品系F1作为苗种,经过连续2-3年北方冬季耐低温养殖，从存活下来的个体中，筛选耐低温的熊本牡蛎杂交大个体做为杂交亲本；通过截头选择法筛选耐低温的5-10％熊本牡蛎杂交大个体做为亲本；g.杂交品系一对一自交：以f步骤得到的杂交亲本，经促熟培育成熟后，进行一对一自交，再进行子代培育及养成，淘汰具有长牡蛎特征的个体,保留耐低温、耐高盐和生长速度快的个体；h.耐低温熊本牡蛎新品种的纯化：将g步骤选育出的耐低温熊本牡蛎个体再进行一对一杂交纯化，经遗传纯化，得到性状不再分离的个体；i.品系纯化：将f,g和h步骤如此反复培育1-2代，即可获得适应北方耐低温熊本牡蛎新品系；e.子代鉴定：在幼虫培育过程中，采用微卫星和SNP检测分子标记确认杂交子一代是熊本牡蛎和长牡蛎杂交子一代。

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