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申请/专利权人：许川;邬红;刘益强;蒋涛
摘要：本发明公开了一种特异性表达人源性SIRPG的转基因小鼠的构建方法，属于生物技术领域，所述方法为利用CRISPR‑Cas9基因敲入技术插入外源基因hSIRPG，具体步骤为：根据小鼠插入位点序列，构建基于CRISPR‑Cas9系统的gRNA和Cas9表达载体，分别体外转录得到gRNA和Cas9mRNA；并根据gRNA作用位点构建含有外源基因的且整合至宿主基因组中的供体质粒，然后将体外转录得到的Cas9mRNA，gRNA和供体质粒显微注射到小鼠受精卵中；取注射后存活的受精卵移植到假孕雌鼠体内，待其怀孕产仔，获得转基因小鼠，还公开了所得转基因小鼠的应用，本发明为研究SIRPG的功能、为探索hSIRPG在人类疾病，尤其是肺癌的发生、发展及治疗尤其是靶向治疗中的作用提供了动物模型，为筛选靶向SIRPG的抑制剂提供了便利。
主权项：1.一种特异性表达人源性SIRPG的转基因小鼠的构建方法，其特征在于，所述方法为利用CRISPR-Cas9基因敲入技术插入外源基因hSIRPG，具体步骤为：根据小鼠插入位点序列，构建基于CRISPR-Cas9系统的gRNA和Cas9表达载体，分别体外转录得到gRNA和Cas9mRNA；并根据gRNA作用位点构建含有外源基因的且整合至宿主基因组中的供体质粒，然后将体外转录得到的Cas9mRNA，gRNA和供体质粒显微注射到小鼠受精卵中；取注射后存活的受精卵移植到假孕雌鼠体内，待其怀孕产仔，获得转基因小鼠；其中，所述外源基因hSIRPG的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示，其编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 许川 邬红 刘益强 蒋涛 一种特异性表达人源性SIRPG的转基因小鼠的构建方法及其应用
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