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用于检测小麦穗发芽抗性基因Tamyb10-D1的分子标记及其应用 

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申请/专利权人:湖北省农业科学院粮食作物研究所

摘要:本发明公开了一种用于检测小麦穗发芽抗性基因Tamyb10‑D1的分子标记及其应用。本发明提供了特异引物对,由引物872s和引物1182a组成;引物872s如序列5所示;引物1182a如序列8所示。本发明提供了特异引物组,除特异引物对中的两条引物,还包括引物122s、引物339s、引物380s、引物652s、引物409a、引物703a和引物1419a中的一条或多条;引物122s如序列1所示;引物339s如序列2所示;引物380s如序列3所示;引物652s如序列4所示;引物409a如序列6所示;引物703a如序列7所示;引物1419a如序列9所示。本发明有助于小麦抗穗发芽分子育种。

主权项:1.特异引物对,由引物872s和引物1182a组成;引物872s如序列表的序列5所示;引物1182a如序列表的序列8所示。

全文数据:用于检测小麦穗发芽抗性基因Tamyb10-D1的分子标记及其应用技术领域本发明属于生物技术领域,具涉及用于检测小麦穗发芽抗性基因Tamyb10-D1的分子标记及其应用。背景技术近年来随着极端气候的频繁发生,小麦穗发芽发生现象呈扩大递增趋势,是影响小麦安全稳产的重要因素之一。利用分子标记辅助育种技术可加速穗发芽抗性小麦品种育成进程,积极应对穗发芽灾害发生。Tamyb10-D1基因被定位于小麦3DL染色体,被证实与小麦穗发芽抗性相关。开发的适宜的分子标记,从而区分穗发芽抗性基因型Tamyb10-D1b和穗发芽感性基因型Tamyb10-D1a,具有重要的价值。当基因型为Tamyb10-D1b时,可获得目标条带,当基因型为Tamyb10-D1a纯合型时,为序列缺失,无扩增产物。Himi等设计Tamyb10-D1分子标记为上游引物Tamyb10-LP9和下游引物Tamyb10-RP3,该标记扩增效果较好,但扩增产物大,对DNA模版质量要求较高。发明内容本发明的目的是提供一种用于检测小麦穗发芽抗性基因Tamyb10-D1的分子标记及其应用。本发明提供了特异引物对,由引物872s和引物1182a组成;引物872s如序列表的序列5所示;引物1182a如序列表的序列8所示。本发明还提供了特异引物组,包括引物872s和引物1182a;引物872s如序列表的序列5所示;引物1182a如序列表的序列8所示。所述特异引物组还包括引物122s、引物339s、引物380s、引物652s、引物409a、引物703a和引物1419a中的任意一条或多条;引物122s如序列表的序列1所示;引物339s如序列表的序列2所示;引物380s如序列表的序列3所示;引物652s如序列表的序列4所示;引物409a如序列表的序列6所示;引物703a如序列表的序列7所示;引物1419a如序列表的序列9所示。本发明还保护特异引物组甲,由引物380s、引物652s、引物872s和引物1182a组成;引物380s如序列表的序列3所示;引物652s如序列表的序列4所示;引物872s如序列表的序列5所示;引物1182a如序列表的序列8所示。本发明还保护特异引物组乙,由引物872s、引物1182a和引物1419a组成;引物872s如序列表的序列5所示;引物1182a如序列表的序列8所示;引物1419a如序列表的序列9所示。本发明还保护特异引物组丙,由引物652s、引物872s、引物1182a和引物1419a组成;引物652s如序列表的序列4所示;引物872s如序列表的序列5所示;引物1182a如序列表的序列8所示;引物1419a如序列表的序列9所示。本发明还保护所述特异引物的应用,为鉴定待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1b基因型还是Tamyb10-D1a基因型。本发明还保护以上任一所述特异引物组的应用,为鉴定待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1b基因型还是Tamyb10-D1a基因型。本发明还保护一种鉴定待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1b基因型还是Tamyb10-D1a基因型的方法,包括如下步骤:以待测小麦的基因组DNA为模板,采用所述特异引物对进行PCR扩增,如果得到特异性扩增产物,待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1b基因型,如果没有得到特异性扩增产物,待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1a基因型。所述特异性扩增产物显示为一条位于300-400bp区间的电泳带。本发明还保护一种鉴定待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1b基因型还是Tamyb10-D1a基因型的方法,包括如下步骤:以待测小麦的基因组DNA为模板,采用特异引物组进行PCR扩增,如果得到特异性扩增产物,待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1b基因型,如果没有得到特异性扩增产物,待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1a基因型。所述特异性扩增产物为至少一种特异性扩增产物。特异引物组为特异引物组甲时,所述特异性扩增产物为两种或三种;两种特异性扩增产物分别显示为一条位于300-400bp区间内的电泳带和一条位于800-900bp区间内的电泳带;三种特异性扩增产物分别显示为一条位于300-400bp区间内的电泳带、一条位于500-600bp区间内的电泳带和一条位于800-900bp区间内的电泳带。特异引物组为特异引物组乙时,所述特异性扩增产物为两种,分别显示为一条位于300-400bp区间内的电泳带和一条位于500-600bp区间内的电泳带。特异引物组为特异引物组丙时,所述特异性扩增产物为两种或三种;两种特异性扩增产物分别显示为一条位于300-400bp区间内的电泳带和一条位于500-600bp区间内的电泳带;三种特异性扩增产物分别显示为一条位于300-400bp区间内的电泳带、一条位于500-600bp区间内的电泳带两条带的叠加和一条位于700-800bp区间内的电泳带。基因型为Tamyb10-D1b基因型即:以待测小麦的基因组DNA为模板,采用LP9RP3引物对进行扩增,具有扩增产物。基因型为Tamyb10-D1b基因型即:以待测小麦的基因组DNA为模板,采用LP9RP3引物对进行扩增,不具有扩增产物。LP9RP3引物对由引物Tamyb10-LP9和引物Tamyb10-RP3组成;引物Tamyb10-LP9如序列表的序列10所示;引物Tamyb10-RP3如序列表的序列11所示。Tamyb10-D1b基因型即穗发芽抗性基因型。Tamyb10-D1a基因型即穗发芽感性基因型。以上任一所述待测小麦为Tamyb10-D1基因的基因型为纯合型的小麦。为了使Tamyb10-D1基因在小麦穗发芽抗性分子育种中得到高效和快速利用,本发明的发明人开发了Tamyb10-D1的多个分子标记,扩增片段多集中在300-1000bp范围,扩增效率较高,PCR产物容易检测,降低了对模板DNA的质量要求。而且通过采用多重PCR技术可提高Tamyb10-D1基因分子标记检测的准确性,适用于批量分子标记检测。本发明开发的分子标记可通过多重PCR高效准确检测小麦穗发芽抗性基因Tamyb10-D1b的基因型,同时含有引物652s或703a的多重PCR可区分普通小麦和粗山羊草的myb10-D1基因型,本发明有助于小麦抗穗发芽分子育种。附图说明图1为实施例2中的电泳图。图2为实施例2中的相对定量结果。图3为实施例3中的电泳图。图4为实施例4中的电泳图。图5为实施例4中的测序结果部分。图6为实施例5中的电泳图。具体实施方式以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自常规生化试剂商店购买得到的。引物Tamyb10-LP9用LP9表示:5’-taggccaacaccttctaaacg-3’;引物Tamyb10-RP3用RP3表示:5’-aggcacaccagcttatttgg-3’。国内小麦品种系:中国春、扬麦20、郑麦9023、鄂麦27、鄂恩5号、苏麦3号、襄麦25、Wuhan1、川麦42、川麦43、鄂麦580、荆州66、济麦22、矮抗58。国外小麦品种系:14FHBSN6405、14FHBSN6418;中国春缺体-四体系材料:N3AT3B,N3BT3A和N3DT3A。以上各个小麦品种系均为纯合基因型。实施例1、引物的设计和制备经过大量序列分析、引物设计以及效果验证,筛选到用于鉴定Tamyb10-D1基因特异性分子标记的的9条引物,其中5条上游引物和4条下游引物,具体序列见表1。表1引物名称核苷酸序列5'→3'Tm值℃122s序列1CCAGACGAGCTGGTAGGTTACTCAC63.6339s序列2AAGAGTGAGATCACTGGTTTAGCTTTAG61.1380s序列3GGTCGTGTTGACGGCGTG60.8652s序列4GCATATTCCTAGTGTAATACGGGGTAC61.6872s序列5CCAACACCTTCTAAACGTATATAACTTCT60.5409a序列6CACAATATCTCACACGCCGTCA61.7703a序列7CATCTTCGTTCACACTATATACTACGTACC61.31182a序列8GGCATTTCGTTCTAGACCTCCAT62.31419a序列9GGTCACTGTTATCTGACGCTGGAT61.6分别合成表1中的各条引物以及引物Tamyb10-LP9和引物Tamyb10-RP3。实施例2、引物的扩增效果供试材料:扬麦20、郑麦9023。1、取供试材料的新鲜叶片,提取基因组DNA。2、以基因组DNA为模板,进行PCR扩增。PCR反应体系20μL:10μL2×EsTaqMasterMixDye,0.4μL引物溶液引物溶液中,每种引物的浓度均为10μmolμl,1μLDNA模板含约30ngDNA,余量为水。2×EsTaqMasterMixDye:康为世纪,产品目录号CW0690M。PCR扩增中分别采用122s409a引物对、122s703a引物对、122s1182a引物对、122s1419a引物对、339s703a引物对、339s1182a引物对、339s1419a引物对、380s703a引物对、380s1182a引物对、380s1419a引物对、652s1182a引物对、652s1419a引物对、872s1182a引物对、872s1419a引物对、LP9RP3引物对。PCR反应程序:95℃预变性3min;95℃变性30s、60℃退火30s、72℃延伸40s,35个循环;72℃延伸7min,10℃保存。3、取步骤2的产物,进行1%琼脂糖凝胶进行电泳,用凝胶成像仪进行拍照。电泳图见图1。图1中:A图,以扬麦20的基因组DNA为模板;B图,以郑麦9023的基因组DNA为模板;M对应DL100DNAmarker,1对应122s409a的扩增产物,2对应122s703a的扩增产物,3对应122s1182a的扩增产物,4对应122s1419a的扩增产物,5对应339s703a的扩增产物,6对应339s1182a的扩增产物,7对应339s1419a的扩增产物,8对应380s703a的扩增产物,9对应380s1182a的扩增产物,10对应380s1419a的扩增产物,11对应652s1182a的扩增产物,12对应652s1419a的扩增产物,13对应872s1182a的扩增产物,14对应872s1419a的扩增产物,15对应LP9RP3的扩增产物。采用LP9RP3引物对进行扩增,扬麦20具有特异性扩增产物、为Tamyb10-D1b纯合基因型,郑麦9023不具有特异性扩增产物、为Tamyb10-D1a纯合基因型。以扬麦20的基因组DNA为模板,采用各个引物对时均具有特异性扩增产物、均判断为Tamyb10-D1b纯合基因型。以郑麦9023的基因组DNA为模板,采用引物380s时存在非特异性扩增但非特异性扩增的条带很弱,采用其他引物时均不存在非特异性扩增。利用凝胶成像软件ImageLab的定量工具对图1的A中的各个特异性扩增条带进行相对量分析,结果见图2。图2中的1至15对应于图1中的泳道1至15。在设定LP9RP3引物对的特异性扩增条带的相对量为1时,122s1182a引物对和122s1419a引物对的特异性扩增条带的相对量均为1左右,其它各个引物对的特异性扩增条带的相对量均显著高于1,380s703a引物对、380s1182a引物对、652s1182a引物对、872s1182a引物对和872s1419a引物对的特异性扩增条带的相对量均为3左右,872s1182a引物对特异性扩增条带的相对量最高达3.34。实施例3、染色体定位分析标记特异性供试材料:中国春;中国春缺体-四体系材料:N3AT3B、N3BT3A和N3DT3A。方法同实施例2。电泳图见图3。图3中,M为DL100DNAmarker,1为中国春,2为N3AT3B,3为N3BT3A,4为N3DT3A;5为以水为模板的空白对照。采用LP9RP3引物对进行扩增,中国春、N3AT3B、N3BT3A均具有特异性扩增产物,N3DT3A不具有特异性扩增产物。采用122s409a引物对、122s703a引物对、122s1182a引物对、122s1419a引物对、339s703a引物对、339s1182a引物对、339s1419a引物对、652s1182a引物对、652s1419a引物对、872s1182a引物对、872s1419a引物对、LP9RP3引物对时,中国春均具有特异性扩增产物,N3AT3B均具有特异性扩增产物,N3BT3A均具有特异性扩增产物,N3DT3A均不具有特异性扩增产物。采用380s703a引物对、380s1182a引物对、380s1419a时,中国春均具有特异性扩增产物,N3AT3B均具有特异性扩增产物,N3BT3A均具有特异性扩增产物,N3DT3A均存在非特异性扩增但非特异性扩增的条带很弱。实施例4、Tamyb10-D1特异性标记对小麦品种的检测一、试验一供试材料:鄂麦27、鄂恩5号、14FHBSN6405、苏麦3号、襄麦25、Wuhan1、川麦42、鄂麦580、14FHBSN6418、荆州66、济麦22、矮抗58。方法同实施例2。电泳图见图4。图4中,M为DL100DNAmarker,1为鄂麦27,2为鄂恩5号,3为14FHBSN6405,4为苏麦3号,5为襄麦25,6为Wuhan1,7为川麦42,8为鄂麦580,9为14FHBSN6418,10为荆州66,11为济麦22,12为矮抗58,13为以水为模板的空白对照。采用LP9RP3引物对进行扩增:鄂麦27、鄂恩5号、14FHBSN6405、苏麦3号、襄麦25、Wuhan1、川麦42,均具有特异性扩增产物,均为Tamyb10-D1b纯合基因型;鄂麦580、14FHBSN6418、荆州66、济麦22、矮抗58,均不具有特异性扩增产物,均为Tamyb10-D1a纯合基因型。采用122s409a引物对、122s1182a引物对、122s1419a引物对、339s1182a引物对、339s1419a引物对、380s1182a引物对、380s1419a、872s1182a引物对或872s1419a引物对进行扩增:鄂麦27、鄂恩5号、14FHBSN6405、苏麦3号、襄麦25、Wuhan1、川麦42,均具有特异性扩增产物,均为Tamyb10-D1b纯合基因型;鄂麦580、14FHBSN6418、荆州66、济麦22、矮抗58,均不具有特异性扩增产物,均为Tamyb10-D1a纯合基因型。采用引物652s652s1182a引物对、652s1419a引物对进行扩增:鄂麦27、鄂恩5号、14FHBSN6405、苏麦3号、襄麦25、Wuhan1,均具有特异性扩增产物,均为Tamyb10-D1b纯合基因型;鄂麦580、14FHBSN6418、荆州66、济麦22、矮抗58,均不具有特异性扩增产物,均为Tamyb10-D1a纯合基因型;川麦42不显示特异性扩增产物。采用引物703a时122s703a引物对、339s703a引物对、380s703a引物对进行扩增:鄂麦27、鄂恩5号、14FHBSN6405、苏麦3号、襄麦25、Wuhan1,均具有特异性扩增产物,均为Tamyb10-D1b纯合基因型;鄂麦580、14FHBSN6418、荆州66、济麦22、矮抗58,均不具有特异性扩增产物,均为Tamyb10-D1a纯合基因型;川麦42不显示特异性扩增产物。二、试验二供试材料:川麦43。PCR扩增中采用122s703a引物对或LP9RP3引物对,其他均同实施例2。采用LP9RP3引物对进行扩增:川麦43具有特异性扩增产物,为Tamyb10-D1b纯合基因型。采用122s703a引物对进行扩增:川麦43不显示特异性扩增产物。三、测序将步骤一中供试材料为川麦42且采用LP9RP3引物对时的扩增产物进行测序。将步骤二中供试材料为川麦43且采用LP9RP3引物对时的扩增产物进行测序。测序结果见图5差异部分。发现川麦42和川麦43的Tamyb10-D1b基因均缺失了14bp片段起始密码子下游671-684bp区域,该缺失位于第二内含子内,正好是引物703a和引物652s的3’端特异性结合区域,因此这两个品种无法用含有引物703a或引物652s的引物对进行扩增。川麦42和川麦43的Tamyb10-D1b基因来自粗山羊草节节麦。因此,与小麦来源的Tamyb10-D1b基因相比,粗山羊草来源的Tamyb10-D1b基因相比存在14bp的缺失。含有引物703a或引物652s的引物对可用于鉴别小麦来源的Tamyb10-D1b基因和粗山羊草来源的myb10-D1b基因。实施例5、多重PCR高效检测Tamyb10-D1基因型因新设计的引物为显性标记,只能检测Tamyb10-D1b基因型,在基因型为Tamyb10-D1a时无扩增产物。为了排除DNA质量等因素造成的无扩增产物或扩增条带浓度低无法检测等情况,采用多重PCR方法,以提高PCR检测结果的准确性。供试材料:鄂麦27、襄麦25、川麦42、川麦43、鄂麦580、14FHBSN6418。一、利用引物组合872s1182a1419a进行2重PCR1、取供试材料的新鲜叶片,提取基因组DNA。2、以基因组DNA为模板,进行PCR扩增。PCR反应体系20μL:10μL2×EsTaqMasterMixDye,0.4μL引物溶液引物溶液中,每种引物的浓度均为10μmolμl,1μLDNA模板含约30ngDNA,余量为水。2×EsTaqMasterMixDye:康为世纪,产品目录号CW0690M。PCR扩增中采用由引物872s、引物1182a和引物1419a组成的引物组合。PCR反应程序:95℃预变性3min;95℃变性30s、60℃退火30s、72℃延伸40s,35个循环;72℃延伸7min,10℃保存。3、取步骤2的产物,进行1%琼脂糖凝胶进行电泳,用凝胶成像仪进行拍照。电泳图见图6A。图6A中,M为DL100DNAmarker,1为鄂麦27,2为襄麦25,3为川麦42,4为川麦43,5为鄂麦580,6为14FHBSN6418;7为以水为模板的空白对照。鄂麦27、襄麦25、川麦42、川麦43,均可以观察到两条特异性扩增产物一条位于300-400bp区间内,一条位于500-600bp区间内,均为Tamyb10-D1b纯合基因型。鄂麦580、14FHBSN6418,均不具有特异性扩增产物,均为Tamyb10-D1a纯合基因型。二、利用引物组合380s652s872s1182a进行3重PCR1、取供试材料的新鲜叶片,提取基因组DNA。2、以基因组DNA为模板,进行PCR扩增。PCR反应体系20μL:10μL2×EsTaqMasterMixDye,0.4μL引物溶液引物溶液中,每种引物的浓度均为10μmolμl,1μLDNA模板含约30ngDNA,余量为水。2×EsTaqMasterMixDye:康为世纪,产品目录号CW0690M。PCR扩增中采用由引物380s、引物652s、引物872s和引物1182a组成的引物组合。PCR反应程序:95℃预变性3min;95℃变性30s、60℃退火30s、72℃延伸40s,35个循环;72℃延伸7min,10℃保存。3、取步骤2的产物,进行1%琼脂糖凝胶进行电泳,用凝胶成像仪进行拍照。电泳图见图6B。图6B中,M为DL100DNAmarker,1为鄂麦27,2为襄麦25,3为川麦42,4为川麦43,5为鄂麦580,6为14FHBSN6418;7为以水为模板的空白对照。鄂麦27、襄麦25,均可以观察到三条特异性扩增产物一条位于300-400bp区间内,一条位于500-600bp区间内,一条位于800-900bp区间内,均为Tamyb10-D1b纯合基因型。川麦42、川麦43,均可以观察到两条特异性扩增产物一条位于300-400bp区间内,一条位于800-900bp区间内,均为Tamyb10-D1b纯合基因型。鄂麦580、14FHBSN6418,均不具有特异性扩增产物,均为Tamyb10-D1a纯合基因型。三、利用引物组合652s872s1182a1419a进行4重PCR1、取供试材料的新鲜叶片,提取基因组DNA。2、以基因组DNA为模板,进行PCR扩增。PCR反应体系20μL:10μL2×EsTaqMasterMixDye,0.4μL引物溶液引物溶液中,每种引物的浓度均为10μmolμl,1μLDNA模板含约30ngDNA,余量为水。2×EsTaqMasterMixDye:康为世纪,产品目录号CW0690M。PCR扩增中采用由引物652s、引物872s、引物1182a和引物1419a组成的引物组合。PCR反应程序:95℃预变性3min;95℃变性30s、60℃退火30s、72℃延伸40s,35个循环;72℃延伸7min,10℃保存。3、取步骤2的产物,进行1%琼脂糖凝胶进行电泳,用凝胶成像仪进行拍照。电泳图见图6C。图6C中,M为DL100DNAmarker,1为鄂麦27,2为襄麦25,3为川麦42,4为川麦43,5为鄂麦580,6为14FHBSN6418;7为以水为模板的空白对照。鄂麦27、襄麦25,均可以观察到三条特异性扩增产物一条位于300-400bp区间内,一条位于500-600bp区间内,一条位于700-800bp区间内,其中500-600bp区间内的扩增产物为两条带的叠加,均为Tamyb10-D1b纯合基因型。川麦42、川麦43,均可以观察到两条特异性扩增产物一条位于300-400bp区间内,一条位于500-600bp区间内,均为Tamyb10-D1b纯合基因型。鄂麦580、14FHBSN6418,均不具有特异性扩增产物,均为Tamyb10-D1a纯合基因型。从图6中可看出,3重PCR的目标条带相对最亮,因此,推荐用引物组合380s652s872s1182a进行3重PCR检测Tamyb10-D1基因型。SEQUENCELISTING湖北省农业科学院粮食作物研究所用于检测小麦穗发芽抗性基因Tamyb10-D1的分子标记及其应用GNCYX19067011PatentInversion3.5125DNAArtificialsequence1ccagacgagctggtaggttactcac25228DNAArtificialsequence2aagagtgagatcactggtttagctttag28318DNAArtificialsequence3ggtcgtgttgacggcgtg18427DNAArtificialsequence4gcatattcctagtgtaatacggggtac27529DNAArtificialsequence5ccaacaccttctaaacgtatataacttct29622DNAArtificialsequence6cacaatatctcacacgccgtca22730DNAArtificialsequence7catcttcgttcacactatatactacgtacc30823DNAArtificialsequence8ggcatttcgttctagacctccat23924DNAArtificialsequence9ggtcactgttatctgacgctggat241021DNAArtificialsequence10taggccaacaccttctaaacg211120DNAArtificialsequence11aggcacaccagcttatttgg20

权利要求:1.特异引物对,由引物872s和引物1182a组成;引物872s如序列表的序列5所示;引物1182a如序列表的序列8所示。2.特异引物组,包括引物872s和引物1182a;引物872s如序列表的序列5所示;引物1182a如序列表的序列8所示。3.如权利要求2所述的特异引物组,其特征在于:所述特异引物组还包括引物122s、引物339s、引物380s、引物652s、引物409a、引物703a和引物1419a中的任意一条或多条;引物122s如序列表的序列1所示;引物339s如序列表的序列2所示;引物380s如序列表的序列3所示;引物652s如序列表的序列4所示;引物409a如序列表的序列6所示;引物703a如序列表的序列7所示;引物1419a如序列表的序列9所示。4.特异引物组,由引物380s、引物652s、引物872s和引物1182a组成;引物380s如序列表的序列3所示;引物652s如序列表的序列4所示;引物872s如序列表的序列5所示;引物1182a如序列表的序列8所示。5.特异引物组,由引物872s、引物1182a和引物1419a组成;引物872s如序列表的序列5所示;引物1182a如序列表的序列8所示;引物1419a如序列表的序列9所示。6.所述特异引物组,由引物652s、引物872s、引物1182a和引物1419a组成;引物652s如序列表的序列4所示;引物872s如序列表的序列5所示;引物1182a如序列表的序列8所示;引物1419a如序列表的序列9所示。7.特异引物对或特异引物组的应用,为鉴定待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1b基因型还是Tamyb10-D1a基因型;所述特异引物对为权利要求1所述特异引物对;所述特异引物组为权利要求2至7中任一所述的特异引物组。8.一种鉴定待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1b基因型还是Tamyb10-D1a基因型的方法,包括如下步骤:以待测小麦的基因组DNA为模板,采用权利要求1所述特异引物对进行PCR扩增,如果得到特异性扩增产物,待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1b基因型,如果没有得到特异性扩增产物,待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1a基因型。9.一种鉴定待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1b基因型还是Tamyb10-D1a基因型的方法,包括如下步骤:以待测小麦的基因组DNA为模板,采用特异引物组进行PCR扩增,如果得到特异性扩增产物,待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1b基因型,如果没有得到特异性扩增产物,待测小麦的Tamyb10-D1基因的基因型为Tamyb10-D1a基因型。

百度查询: 湖北省农业科学院粮食作物研究所 用于检测小麦穗发芽抗性基因Tamyb10-D1的分子标记及其应用

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