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一种祁术成熟胚高效离体再生体系建立的方法 

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申请/专利权人:中国科学院合肥物质科学研究院

摘要:本发明公开一种祁术成熟胚高效离体再生体系建立的方法,包括以下步骤:种子的选取与预处理,将低温等离子体活化水应用到预处理过程中;将预处理后的成熟胚,接种于不定芽诱导培养基中,进行不定芽的诱导培养;将诱导出不定芽的成熟胚转接于增殖培养基中进行不定芽的增殖培养;将增殖的不定芽丛切成适宜大小的切块,转接于伸长培养基中进行不定芽的伸长培养;待不定芽长至2~3cm并伴有完整叶片时,转入生根培养基中进行生根培养,最终获得完整的祁术再生植株。本发明将低温等离子体活化水应用到预处理过程中,然后通过直接诱导丛生芽再生来实现对祁术种苗的快速繁殖,为祁术种苗的高效繁育及规模化生产提供了有力的技术保证。

主权项:1.一种祁术成熟胚高效离体再生体系建立的方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)种子的选取与预处理,将选取的种子用过滤灭菌的低温等离子体活化水浸泡2~4min,然后用无菌滤纸吸干种子表面水分,备用;(2)将预处理后的成熟胚,接种于不定芽诱导培养基中,进行不定芽的诱导培养;(3)将诱导出不定芽的成熟胚转接于增殖培养基中进行不定芽的增殖培养;(4)将增殖的不定芽丛切成适宜大小的切块,转接于伸长培养基中进行不定芽的伸长培养;(5)待不定芽长至2~3cm并伴有完整叶片时,转入生根培养基中进行生根培养,最终获得完整的祁术再生植株;所述步骤(1)中,低温等离子体活化水中,Ar为离子源,通过介质阻挡放电装置处理双蒸水2min;所述步骤(2)中,所述的不定芽诱导培养基为:DKW+0.5~2.0mgLZT+2.0~5.0mgLAgNO3+3.0%wv蔗糖+0.7%wv琼脂,pH=5.8;所述步骤(3)中,所述的不定芽增殖培养基为:DKW+0.2~1.5mgLZT+0.05~0.5mgLTDZ+3.0%wv蔗糖+0.7%wv琼脂,pH=5.8;所述步骤(4)中,所述的不定芽伸长培养基为:DKW+0.05~0.5mgLGA3+0.2~1.0mgLKT+3.0%wv蔗糖+0.7%wv琼脂,pH=5.8;所述步骤(5)中,所述的不定芽生根培养基为:18DKW+10~50µM褪黑素+0.1~2.0mgLKIBA+1.0~2.0%wv蔗糖+0.7%wv琼脂,pH=5.8。

全文数据:

权利要求:

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