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申请/专利权人：国科温州研究院(温州生物材料与工程研究所)
摘要：本发明提供一种用于dPCR法核酸检测的光响应性凝胶微球及其在奇异变形杆菌检测中的应用，通过将四氧化三铁磁性纳米颗粒和氧化石墨烯纳米片层黏连，再沉积二氧化硅于外表面，制得具有高效近红外光产热和磁响应特性复合纳米材料；将它与低熔点琼脂糖预混在PCR反应液中，再通过微流控芯片乳化制备复合凝胶微球从而获得具备光热响应和磁响应的dPCR微载体。通过调控光响应性凝胶微球添加量和标定近红外光强程序，实现PCR的温度循环过程。扩增反应后微球凝固成球能储存单分子的信息。本发明制备的智能微球阵列成本低，仪器和操作简单，适宜推广，此检测方法可有效、方便应用在健康卫生和公共安全等多领域，具有深刻的社会和临床价值。
主权项：1.一种用于dPCR法核酸检测的光响应性凝胶微球，其特征在于，制备方法包括以下步骤：步骤一、制备四氧化三铁@氧化石墨烯@二氧化硅复合材料通过水热方法合成四氧化三铁纳米微球；将四氧化三铁纳米微球与多巴胺、盐酸、Tris碱混合搅拌六个小时，直至溶液变为棕色，四氧化三铁纳米微球表面负载了聚多巴胺层；将上述溶液置换为单层氧化石墨烯分散液，常温共混搅拌六个小时，生成表面粘有少层氧化石墨烯的四氧化三铁纳米粒子；将表面粘有氧化石墨烯的四氧化三铁纳米粒子经过乙醇、去离子水反复清洗后，在60℃、碱性条件下与正硅酸乙酯共混一个小时，即生成四氧化三铁@氧化石墨烯@二氧化硅复合材料；经过乙醇、去离子水反复清洗后，分散于水中待用；步骤二、制备近红外光响应变温的凝胶微球制备微流控芯片，将步骤一所制备的四氧化三铁@氧化石墨烯@二氧化硅复合材料、微滴原材料溶液、PCR试剂和待测样品混合作为内相，以含有含氟界面活性剂的HFE7500油相为外相；通过注射泵分别将内相和外相注入芯片，内相在芯片内被外相切割，得到微滴，即为光响应可变温凝胶微球。
全文数据：
权利要求：
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