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申请/专利权人：中国人民解放军空军军医大学
摘要：一种慢病毒转染技术构建高水平表达CD226分子的THP‑1细胞系的方法。CD226分子已经被证明在巨噬细胞功能调控中发挥重要作用，为了更好地观测CD226分子在人单核巨噬细胞发挥功能中的作用，本发明采用慢病毒转染技术构建了稳定高水平表达CD226分子的THP‑1细胞系，该细胞系可实现CD226分子在该细胞中的高水平表达，促进THP‑1细胞的活化，增强THP‑1细胞表面抗原提呈分子的表达水平，调控其吞噬能力；另一方面，将高表达CD226分子的THP‑1细胞进行GFP荧光标记，使该细胞系细胞迁移水平提高的同时，实现对该细胞系细胞迁移轨迹的实时记录。
主权项：1.一种慢病毒转染技术构建CD226分子高表达的THP-1细胞系的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、慢病毒感染：1）对过表达的CD226分子进行绿色荧光蛋白标记；2）将THP-1细胞接种于六孔板；3）提前更换新鲜的培养基；4）每孔加入慢病毒感染增强液；5）封闭培养板，平角转子离心机离心后，继续培养；6）培养后更换为新鲜的培养基，在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白标记的CD226慢病毒感染效率；步骤2、嘌呤霉素筛选：将细胞继续培养于含有Puromycin的培养基中，筛选后，空细胞加Puromycin组全部死亡，剩余细胞即为病毒感染成功的阳性细胞，为稳定表达CD226分子的THP-1细胞系。
全文数据：
权利要求：
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