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一种铁甲草胚性愈伤组织诱导及悬浮细胞培养方法 

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申请/专利权人:嘉应学院

摘要:本发明公开了一种铁甲草胚性愈伤组织诱导及悬浮细胞培养方法。本发明以无菌培养的铁甲草幼苗嫩叶为外植体,将其诱导产生易碎胚性愈伤组织,优化影响细胞悬浮系培养的不同营养条件和培养条件,从而建立铁甲草悬浮细胞系的培养方法,利用该方法获得能够长期继代培养并能形成均一化的单细胞和小细胞团的培养体系。通过HPLC测定,在同等质量下,铁甲草悬浮细胞的大黄素含量是原药材的12.22倍。铁甲草悬浮细胞系在大黄素的生产方面具有一定的潜力,具有较好的应用前景。

主权项:1.一种铁甲草胚性愈伤组织诱导及悬浮细胞培养方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、取铁甲草无菌苗嫩叶,接种到诱导培养基中诱导培养25-35d,获得胚性愈伤组织;所述的诱导培养基为12MS培养基+3.0mgLBA+1.0mgLNAA+8gL琼脂+30gL蔗糖,pH5.8-6.0;培养条件为:光照12hd、光照强度2000~2500lx、温度28±2℃;S2、取胚性愈伤组织,接种于悬浮培养基中,置于摇床中暗培养15-30d,获得悬浮细胞;所述的悬浮培养基为12MS培养基+3.0mgLBA+1.0mgLNAA+30gL蔗糖,pH5.8-6.0。

全文数据:

权利要求:

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