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申请/专利权人：中国农业科学院作物科学研究所

摘要：本发明一种获得黍稷胚性愈伤组织的方法，包括如下步骤：a1将黍稷成熟种子脱壳消毒后接种于诱导培养基上进行诱导培养，获得初生愈伤组织；a2挑选a1中状态较好的初生愈伤组织继代培养，继代培养所用培养基为继代培养基，获得胚性愈伤组织；a3挑选a2中淡黄色且质密的胚性愈伤组织进行分化再生培养，直到分化出绿芽，以便评价不同黍稷种子的再生能力。通过优化培养基组分，诱导获得了适合遗传转化的红糜胚性愈伤组织，建立了基于农杆菌介导的红糜遗传转化体系，获得了以潮霉素作为筛选标记的转基因植株。本发明对挖掘黍稷抗逆功能基因与建立黍稷生物育种体系具有重要意义。

主权项：1.一种获得黍稷胚性愈伤组织的方法，包括如下步骤：a1将黍稷成熟种子脱壳消毒后接种于诱导培养基上进行诱导培养，获得初生愈伤组织；a2挑选a1中状态较好的初生愈伤组织继代培养，继代培养所用培养基为继代培养基，获得胚性愈伤组织；a3挑选a2中淡黄色且质密的胚性愈伤组织进行分化再生培养，直到分化出绿芽，以便评价不同黍稷种子的再生能力；步骤a1中，所述诱导培养基的溶剂为水，溶质为MS盐、N6维生素、脯氨酸、肌醇、6-BA、天冬氨酸、蔗糖、2,4-D和植物凝胶；在所述诱导培养基中，所述MS盐的终浓度为2.5-7gL、所述N6维生素的终浓度为0.5-3mlL、脯氨酸的终浓度为0.5-3gL、肌醇的终浓度为0.01-2gL、6-BA的终浓度为0.01-2gL、天冬氨酸的终浓度为0.05-3gL、蔗糖的终浓度为5-100gL、2,4-D的终浓度为1-5mgL、植物凝胶的终浓度为1-12gL；步骤a3中，将所述胚性愈伤组织进行分化再生培养时采用的分化再生培养基的溶剂为水，溶质为MS盐、烟酸、维生素B6、维生素B1、肌醇、硫酸铜、蔗糖、琼脂、6-BA和羧苄青霉素；在所述分化再生培养基中，所述MS盐的终浓度为2.5-7gL、烟酸的终浓度为0.5-3mgL、维生素B6的终浓度为0.5-3mgL、维生素B1的终浓度为1-10mgL、肌醇的终浓度为50-200mgL、硫酸铜的终浓度为0.5-4mgL、蔗糖的终浓度为10-100gL、琼脂的终浓度为1-12gL、6-BA的终浓度为1-3mgL、羧苄青霉素的终浓度为50-400mgL。

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