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基于RNA样本构建文库的方法及应用 

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申请/专利权人:深圳华大生命科学研究院

摘要:提供了一种基于RNA样本构建文库的方法及应用。该方法包括:1将所述RNA样本进行逆转录反应,以便获得DNA‑RNA杂合链;2将所述DNA‑RNA杂合链和核糖核酸内切酶、第一DNA聚合酶、第二DNA聚合酶以及dATP反应,获得末端加dA的双链DNA,所述第一DNA聚合酶具有5’‑3’外切酶活性和3’‑5’外切酶活性,所述第二DNA聚合酶不具有3’‑5’外切酶活性;3将所述末端加dA的双链DNA与测序接头连接,以便获得连接产物;4将所述连接产物进行PCR扩增,以便获得测序文库。

主权项:1.一种基于RNA样本构建文库的方法,其特征在于,包括:1将所述RNA样本进行逆转录反应,以便获得DNA-RNA杂合链;2将所述DNA-RNA杂合链和核糖核酸内切酶、第一DNA聚合酶、第二DNA聚合酶以及dATP反应,获得末端加dA的双链DNA,所述第一DNA聚合酶具有5’-3’外切酶活性和3’-5’外切酶活性,所述第二DNA聚合酶不具有3’-5’外切酶活性;3将所述末端加dA的双链DNA与测序接头连接,以便获得连接产物;4将所述连接产物进行PCR扩增,以便获得测序文库。

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