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申请/专利权人:中国科学院遗传与发育生物学研究所
摘要:本发明公开了一种使用融合蛋白体外重组多亚基SCFE3连接酶的方法及应用。本发明公开的使用融合蛋白体外重组多亚基SCFE3连接酶的方法,包括将设计改造的SKP1‑Cullin1‑RBX1融合蛋白质简称为eSCR与F‑box蛋白质在反应体系中进行反应,得到E3连接酶;eSCR融合蛋白质的氨基酸序列是SEQIDNo.2的第10‑1062位。实验证明,本发明在体外成功利用eSCR融合蛋白质重组了不同的多亚基SCFE3连接酶,且所得E3连接酶具有生物学活性,本发明在解析多亚基SCFE3连接酶分子作用机理的广泛潜在的应用。
主权项:1.一种E3连接酶的体外制备方法,包括:将eSCR融合蛋白质与F-box蛋白质在反应体系中进行反应,得到E3连接酶;所述eSCR融合蛋白质为如下A1)或A2):A1)氨基酸序列是SEQIDNo.2的第10-1062位的融合蛋白质;A2)在A1)的N端或C端连接标签得到的融合蛋白质;所述反应体系还含有50mMTris-HCl缓冲液pH7.4、MgCl2、DTT、ATP。
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权利要求:
百度查询: 中国科学院遗传与发育生物学研究所 一种使用融合蛋白体外重组多亚基SCF E3连接酶的方法及应用
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