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申请/专利权人：中国农业大学

摘要：本发明涉及一种用于检测大豆植物MON87705的核酸检测方法，以双重环介导等温扩增技术、链置换反应、CRISPRCas12a构建侧流层析传感器，根据大豆内参基因Lectin的LAMP产物设计SD反应序列，根据转基因大豆MON87705转化体特异性序列的LAMP产物设计crRNA，利用碱基互补原理与CRISPRCas12a反应的反式切割活性，只需在一次检测流程中分别读取两次LFB的检测结果，即可实现大豆内参基因Lectin与转基因大豆MON87705转化体特异性序列的逻辑化检测。

主权项：1.一种用于检测大豆植物MON87705的LAMP-SD-CRISPR的LFB检测组合，其特征在于，所述LFB检测组合包括双重LAMP引物组、SD长链及短链组合、crRNA和LFB传感器核酸组合；所述双重LAMP引物组为第一引物组或第二引物组：所述第一引物组为LectinF3、LectinB3、LectinFIP、LectinBIP、F31、B31、FIP1和BIP1，分别如SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3和SEQIDNO:4所示；所述第二引物组为LectinF3、LectinB3、LectinFIP、LectinBIP、F34、B34、FIP4和BIP4，分别如SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13和SEQIDNO:14所示；所述SD长链及短链组合中，长链序列为CGACTTATTGAGTTGTAACTTTCCCGA，如SEQIDNO:26所示；短链序列为ACAACTCAATAAGTCG，如SEQIDNO:27所示；所述crRNA选自如下序列之一：UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUAGGACAACGGUGCCUUGGCC，如SEQIDNO:23所示；UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCCGGACAUGAAGCCAUUUAC，如SEQIDNO:24所示；所述LFB传感器核酸组合包括T线核酸、C线核酸和金纳米-核酸信号探针；所述T线核酸的序列为TGAGTTGTTTTTTT，如SEQIDNO:29所示；所述C线核酸的序列为TTTTTTATAAGTCG，如SEQIDNO:30所示；所述金纳米-核酸信号探针的序列为CCCCCCCGACTTAT，如SEQIDNO:28所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业大学 一种用于检测大豆植物MON87705的核酸检测方法