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申请/专利权人:广西壮族自治区亚热带作物研究所(广西亚热带农产品加工研究所)
摘要:本发明涉及植物显微技术领域,具体是一种睡莲授粉后花粉管与胚珠的显微方法以及光学显微压片制作方法。本申请制作得到睡莲授粉后花粉管与胚珠的光学显微压片,可以在光学显微镜下观察,花粉管呈深蓝色近似黑色,能清晰看到花粉管在睡莲雌蕊中的生长情况,包括授粉后花粉管的生长途径与镜检区域的胚珠数量。该压片无需在荧光显微镜下观察雌蕊中的花粉管与胚珠,仅仅依靠光学显微镜即可,极大的降低了观测成本。
主权项:1.一种睡莲授粉后花粉管与胚珠的光学显微方法,其特征在于,按照如下光学显微压片制作方法制作得到睡莲授粉后花粉管与胚珠的光学显微压片,然后在光学显微镜下观察,花粉管呈深蓝色;睡莲授粉后花粉管与胚珠的光学显微压片制作方法:由对授粉后的睡莲花雌蕊的采样、子房室分离、固定样本、软化组织、组织染色、组织压片、干燥七个步骤组成,各步骤具体操作如下:1采样:摘下已经授粉的睡莲花花朵,剥离花瓣、花托,仅留下雌蕊;2子房室分离:将子房室一一分离;所述将子房室一一分离的方法,具体是:每个子房室外侧上方有一个雌蕊附属物,沿着雌蕊附属物的边缘进行切片,将子房室一一分离;3固定样本:迅速将样本轻轻放入组织固定液中,杀死细胞,固定24小时以上;所述固定液的配比使用体积分数为80%乙醇、体积分数35%甲醛、体积分数35%冰醋酸混合而成,且体积比为10:1:1;4软化组织:在23-27℃条件下,将组织浸泡在4-6molLNaOH溶液中静置6-8小时;5组织染色:将完成软化的待检样本置于盛有蒸馏水的培养皿清洗,随后,将样本置于乳酸酚棉蓝染色液中染色,静置8至12分钟;6组织压片:采用“载玻片+材料+载玻片”的方式进行压片处理;7干燥:将样本制片置于恒温电烘箱中,33-37℃干燥3至5小时,去除样本中的水分。
全文数据:
权利要求:
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