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申请/专利权人:江苏省农业科学院
摘要:本发明提供一种鉴定水稻叶色基因AAT1不同基因型的多重PCR分子标记方法,涉及生物技术领域,采用两对分子标记引物AAT1‑T‑F、AAT1‑T‑R和AAT1‑K‑F、AAT1‑K‑R扩增水稻基因组DNA;若含有224bp特征条带,则为含叶色基因型AAT1TAAT1T的纯合体;若含有274bp特征条带,则为含叶色基因型AAT1KAAT1K的纯合体,若同时存在274bp和224bp两条特征条带,则为含叶色基因型AAT1TAAT1K的杂合体。本发明提供的分子标记是根据基因间的单核苷酸变异设计的功能性标记,能直接反映植株的基因型和表型,准确可靠;能高效快捷的区别纯合和杂合基因型,避免检测过程中试验流程烦琐、费用昂贵等弊端,适合对大规模水稻资源和育种材料进行鉴定和选择。
主权项:1.一种鉴定水稻叶色基因AAT1不同基因型的多重PCR分子标记方法,其特征在于,包括下述步骤:采用两对分子标记引物AAT1-T-F、AAT1-T-R和AAT1-K-F、AAT1-K-R扩增水稻基因组DNA;若含有224bp特征条带,则为含叶色基因型AAT1TAAT1T的纯合体;若含有274bp特征条带,则为含叶色基因型AAT1KAAT1K的纯合体,若同时存在274bp和224bp两条特征条带,则为含叶色基因型AAT1TAAT1K的杂合体;其中,AAT1-T-F序列:5'-GCCTCCTTCCTCGCGAAAACCACCAAACCA-3'AAT1-T-R序列:5'-GGTGACGCCGAGGATGGGGTCCTTTGG-3'AAT1-K-F序列:5'-GCTGTTCGGCCACGTCGAGCCGGATT-3'AAT1-K-R序列:5'-TTCAGCATCCCCGCCCAACATCTCCGTC-3'。
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