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一种敲低USP2基因抑制果蝇巨噬细胞吞噬功能的方法 

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申请/专利权人:重庆医科大学

摘要:本发明公开了一种敲低USP2基因抑制果蝇巨噬细胞吞噬功能的方法,属于细胞生物技术领域,本发明通过筛选得到一种影响果蝇巨噬细胞吞噬功能的USP2基因,在果蝇中降低USP2基因的表达量,可以抑制果蝇巨噬细胞的吞噬作用,USP2基因可用于转基因果蝇巨噬细胞功能的研究,对于进一步认识免疫细胞的功能和疾病的发生机制提供新的思路,本发明还提供了一种研究果蝇巨噬细胞吞噬功能的简单、可行的检测方法,使得在研究过程中对巨噬细胞功能的检测更为方便有助于提高对免疫相关疾病的诊断和治疗。

主权项:1.一种敲低USP2基因抑制果蝇巨噬细胞吞噬功能的方法,其特征在于,包含如下步骤:a基于果蝇USP2基因,设计合成一对寡核苷酸序列:USP2RNAi-F:ctagcagtGCTATGATTCACCTACGTACAtagttatattcaagcataTGTACGTAGGTGAATCATAGCgcgSEQIDNO.1;USP2RNAi-R:aattcgcGCTATGATTCACCTACGTACAtatgcttgaatataactaTGTACGTAGGTGAATCATAGCactgSEQIDNO.2;b将寡核苷酸序列经过退火后与pUAST-attB质粒载体连接,构建转基因质粒pUAST-attB-USP2RNAi;c将转基因质粒pUAST-attB-USP2RNAi注入果蝇的受精卵的尾部,并放在25℃的湿盒中培养;所得的受精卵孵化的幼虫待其羽化成成虫后与野生型果蝇杂交,挑取子代眼色为红色的果蝇即为带有pUAST-attB-USP2RNAi的转基因果蝇;d将步骤c得到的转基因果蝇与双平衡子果蝇SpCyo;TM3TM6B杂交一代后自交,筛选得到可稳定遗传的UAS-USP2RNAi果蝇;e将UAS-USP2RNAi果蝇与基因型为Hml-Gal4,UAS-GFP果蝇杂交,即可得到果蝇巨噬细胞中USP2基因敲低的果蝇Hml-Gal4,UAS-GFPUAS-USP2RNAi;f通过显微镜表征果蝇巨噬细胞吞噬功能。

全文数据:

权利要求:

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