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申请/专利权人:重庆市畜牧科学院
摘要:本发明公开了一种鹅GnIH受体RFRPR高效可溶性原核表达体系构建的方法,涉及分子生物学领域,本发明的技术方案包括如下:设计RFRPR引物并利用RFRPR引物对cDNA模板进行PCR扩增和产物纯化;构建、筛选与鉴定RFRPR基因原核表达质粒;重组RFRPR蛋白的诱导表达、纯化及WB鉴定。成功将鹅RFRPR基因CDS区克隆到原核表达载体PET28a+中,优化表达条件获得了RFRPR可溶性的表达产物,其浓度达到30mgL,且融合蛋白保留了蛋白的7跨膜完整结构,具有一定的生物活性,该表达系统为后续研究RFRPR的生理功能、制备多克隆抗体、筛选高亲和性多肽和GnIH受体类似物药物等奠定了基础。
主权项:1.一种鹅GnIH受体RFRPR高效可溶性原核表达体系构建的方法,其特征在于,原核表达载体系统通过基因克隆,将外源目的基因克隆到原核表达载体,并将载体转化到表达工程菌株中,进行外源目的基因的表达。
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百度查询: 重庆市畜牧科学院 一种鹅GnIH受体RFRPR高效可溶性原核表达体系构建的方法
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